Small RNA测序

技术路线

1.从总RNA中纯化分析小RNA； 

2.连接RNA接头并纯化

3.合成第一链及第二链cDNA； 

4.PCR扩增测序文库； 

5.在经qPCR质量检测合格后进行Solexa高通量测序。 

 信息分析内容

1、 快速获得您感兴趣的细胞、组织或生物体内的miRNA种类及其丰度，并发现新的miRNA，以及不同细胞或者不同组织内的miRNA的差异表达信息。

2、 研究某种基因如何通过miRNA途径影响该基因的表达调控和发挥其生物学功能。

3、 研究miRNA在癌症或者其他疾病中的作用机制，并对该疾病的诊断和治疗提供重要解决策略。

4、 研究miRNA在某病毒侵染和抗病毒中的作用，为有效抵抗该病毒侵染提供重要解决策略。

5、 研究miRNA在植物的正常生长，抗旱、抗逆等过程中均起着重要的生物学功能。

送样要求

样品浓度：总RNA样品浓度不低于750ng/ul，总量不低于20ug，提取总RNA时请避免使用过柱法；Small RNA 样品浓度不低于2ng/ul，且Small RNA：Total RNA≥0.3%。

样品纯度：总RNA样品OD值在1.8-2.2之间，制备样品时请不要使用LiCl沉淀。建议在条件允许情况下，提供可供两次样品制备的量，以保证测序的按时进行。

需提供每个样品具体的浓度、体积、溶剂成分、制备时间以及物种来源，同时附上QC数据，可包括电泳胶图、分光光度或者Nanodrop仪器检测数据、Agilent Bioanalyzer仪器检测数据等（我们要求至少要有其中一种的检测结果），确保总RNA 28S：18S至少大于1.8。

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