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奶及奶制品中黄曲霉素M1专业解决方案

浏览次数:1383 发布日期:2012-1-4  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
泰乐祺科技 推出奶及奶制品中黄曲霉素M1专业解决方案-
     针对近日来国家质检总局公布了的蒙牛乳业(眉山)和福建长富纯牛奶抽查的产品被检出黄曲霉毒素M1超标的问题。蒙牛乳业对此向民众进行了致歉申明,反应了民族企业的责任心和对食品安全的重视。对于黄曲霉毒素M1的限量,在之前的相关食品卫生标准中有明确规定,其中:鲜乳及其乳制品(折算为鲜乳汁)不得超过0.5ug/kg;婴儿代乳食品不得检出黄曲霉毒素b1。(GB 2761-2005国家标准—食品中真菌毒素限量 GB 9676-2003国家标准—乳及乳制品中黄曲霉毒素M1限量!
黄曲霉毒素主要存在于谷物、坚果、花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中以及一些与人类血液,动物饲料相关的产品中。霉菌的生长并不一定表明黄曲毒素的存在,因为黄曲毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉素B类具有蓝色荧光,G类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(B1,B2,G1,G2),还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉素M,其中毒性最高的M的代谢物为4-羟基化的产物Bs.黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物,也是一种强致癌物质。其危害巨大,人类日常消费食品中如牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时,可导致肝癌甚至死亡。毒性是砒霜的100倍其实主要是指黄曲霉毒素比砒霜毒。
目前来讲,Aflatoxin M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC),酶联免疫检测法等。液相色谱法可以精确的检测奶制品中黄曲霉毒素的微小含量。而使用黄曲霉毒素M1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素M1残留。
作为国内专业从事霉菌毒素检测技术与产品服务的主要供应商, 2010年泰乐祺科技投巨资成立了"检测应用实验室",重点关注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等检测技术问题,以期望快速提出解决方案。近期应针对奶中出现的黄曲霉毒素M1超标问题,泰乐祺科技提供了两种检测方案,可以帮助企业轻松应对奶中黄曲霉毒素M1的限量检测。
 
高效液相色谱法:
根据国标《GB 5413.37—2010》食品安全国家标准乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定
 实验用前处理:
实验仪器和好耗材包括:
恒温水浴锅 溶剂过滤器(带真空泵)1000ml  高速匀质器 黄曲霉毒素免疫M1亲和柱玻璃纤维滤纸 玻璃注射器 无荧光特性玻璃试管 空气压力泵 超声波清洗机  定量滤纸 量筒 样品瓶 容量瓶 移液器或移液管
  实验用试剂:色谱乙腈色谱甲醇 氢氧化钠 石油醚 超纯水或去离子水等等
HPLC条件:
高效液相色谱仪
 
色谱柱
C18柱,150*4.6mm,5um
流动相
乙腈-水(25:75)
荧光检测器:
激发波长365nm,发射波长435nm;
柱  温
室温
流速
1.0ml/min
进样量
20ul
出峰时间
10分钟左右
 
样品取样:真菌毒素分析的最大误差来源是样品的收集和取样过程,所以必需保证样品收集和取样具有代表性。
样品前处理:分不同样品
牛奶  水浴加热至40度,离心用上清液过柱净化;
乳粉和粉状婴幼儿配方食品:称取适量奶粉样品,用于蒸馏水中,混合均匀使其充分溶解,离心离心用上清液过柱净化;
发酵乳(包括固体状、半固体状和带果肉型):称取适量奶粉样品,用于蒸馏水中,调节PH值至微碱性,高速均质器匀浆,水浴加热后离心,取上清液混合均匀使其充分溶解,离心离心用上清液过柱净化;
干酪:称取适量切细或粉碎,过筛用加纯水溶解,高速均质器匀浆,超声提取后收集上清液,然后用石油醚进行两次萃取,然后用适宜的有机溶液萃取,取若干上清液过柱净化
奶粉样品,用于蒸馏水溶解中,调节PH值至微碱性,水浴加热后离心,取上清液混合均匀使其充分溶解,离心离心用上清液过柱净化;
奶油:称取适量加甲醇水溶解,震荡后分页漏斗取下层溶液,蒸干后溶于水用于过柱净化。
免疫柱净化步骤:完全符合GB/T 18980-2003
┅┅取出免疫亲和层析柱, 恢复至室温,将上方塞子取出斜剪断,再插回亲和柱上。
┅┅将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下。准确移取清澈液注入玻璃注射器;
┅┅将空气压力泵与玻璃注射器连接,调节压力使溶液以约2-3mL/min流速缓慢通过免疫亲和柱,直至2~3mL空气通过柱体;
┅┅更换玻璃注射器与亲和柱连接,在注射器中加入10ml水,调节压力使水以约6mL/min流速清洗亲和柱。
┅┅准确加入4mL色谱级乙腈洗脱,流速为1 mL/min ~2mL/min,收集全部洗脱液于玻璃试管中,供检测。
注:收集管中的洗脱液即为纯化后的样品,可直接用ELISA,荧光和高效液相等方法检测。
HPLC 检测需要仪器与耗材
产品名称
说明
规格
黄曲霉毒素M1固体标准品
参比对照使用
100ug 1mg  
黄曲霉毒素M1液体标准品
浓度0.5ug/ml, 溶于乙腈
1ml 
PriboFast 黄曲霉素M1免疫亲和柱
用于 样品前处理柱 分析黄曲霉素
25/50T
PriboFast泵流操作架(8位)
用于免疫亲和柱净化样品处理,方便控制流速
 
黄曲霉毒素检测专用玻璃纤维滤纸
用于去除HPLC检测时部分杂峰,有效提高灵敏度。110,1.5um
100P
 
不锈钢均质器
 高速匀浆样品,有效提高萃取效率
 
旋转蒸发仪-超声波发生器
 
 
酶联免疫检测法:符合国家标准
酶联免疫检测法采用竞争ELISA,在微孔板上预包被黄曲霉毒素B1抗原,加入样本(或黄曲霉毒素M1标准品溶液)及辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素M1抗体。样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素M1与预包被在板孔上的黄曲霉毒素M1抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素M1抗体。未结合的酶标抗体在洗涤时被除去。再加入TMB显色液,读取吸光值。样本的吸光值与其所含残留物黄曲霉毒素M1抗原的含量成负相关。对照标准曲线,即可得出相应残留物黄曲霉毒素M1的含量。
样品处理
牛奶 直接离心取上清液用于检测
奶粉及其他固状奶制品:需要溶解于去离子水中,离心取上清液用于检测
试剂盒检测时间:30分钟+30分钟
交叉反应率:
Aflatoxin M1
100%
Aflatoxin B1
8%
Aflatoxin B2
10%
Aflatoxin G1
7%
Aflatoxin G2
5%
 
ELISA 方法检测需要:
 
说明
 
PriboFast 黄曲霉毒素M1酶联免疫检测试剂盒
检测范围 (0.1 ppb -8.1ppb)
96孔
雷勃半支灭菌移液器(彩色)
多个量程:0.5-10; 20-200; 5-50; 1000-5000ul
支
雷勃八道半支灭菌移液器
量程: 5-50ul; 50-300ul
支
酶标仪
进口、国产仪器,
台
  分析人员要求:
化学分析仪器及其相关专业或有高效液相色谱仪操作经验的人员。
 
注:作为面向全球提供霉菌毒素检测技术解决方案的主要服务商之一,PriboLab凭借强大的研发团队和霉菌毒素检测技术的研究,为全球农业生产、食品加工与粮食、饲料工业等行业提供专业的真菌毒素检测技术产品与技术服务。北京泰乐祺作为 PriboLab在中国的唯一合作伙伴,积极为国内客户提供优质的霉菌毒素检测技术与产品服务,为国内客户提供适宜的霉菌毒素检测方案,帮助国内客户建立高效优质的霉菌毒素项目检测平台。
 
 
 
发布者:青岛普瑞邦生物工程有限公司
联系电话:17657127618
E-mail:wangyujuan@pribolab.com

网友评论 已有[1]人评论
beijing (111.194.235.243)
目前霉菌毒素的检测方法包括薄层色谱法、酶联免疫法、免疫亲和柱净化高效液相色谱法。但薄层色谱法操作繁琐、污染大、定量差、耗时长;而酶联免疫法虽操作简单、灵敏度高,但特异性差,假阳性高;免疫亲和柱高效液相色谱法成本太高, 对于高黄曲霉毒素含量的样品偏差较大。迫切需要一种样品处理简便易行、快速准确、灵敏度高、检测限低,检测成本低廉的检测方法和技术。尤其液相色谱分离技术具有分析速度快、样品用量少、灵敏度高、分离和测定一次完成,得到越来越多行业和单位的应用,然而整个过程样品前处理的好坏将直接导致测量结果的准确与否,对样品净化的方法要求更高。Pribolab推出的新一代霉菌毒素净化柱产品,在创新发展了霉菌毒素检测的样品处理技术基础上,可以保证整个检测一开始就具有较高的重现性和可靠性。 现代前处理技术在要求净化效果的同时,越来越追求方法的快速及易操作性,PriboFast○R系列多功能净化柱采取的方法就是多重机制吸附杂质并快速萃取净化的方法,,它将极性、非极性及离子交换等多类官能基团作为复合吸附填料作为填充剂填充到柱体中,这些填料可以选择性的吸附样品中的如脂类、蛋白类和色素等主要杂质吸附,同时将待测目标物(如中黄曲霉毒素 玉米赤霉烯酮等各种霉菌毒素)留在样液中,从而达到净化和富集的目的。 使用PriboFast○R 系列多功能净化柱,能够及时快速地对从食品、饲料、饮料、药材中提取的待检液进行净化,过柱净化后的样品可以用于检测黄曲霉毒素、 玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇等多种霉菌毒素。与一般的固相萃取柱(SPE)和亲和柱相比,多功能净化柱无需活化、上样、洗脱等步骤,能够将食品或饲料提取液中的杂质与真菌毒素进行一步分离,使用快捷、方便,减少萃取步骤,有效保证分析的更加准确可靠,降低检测成本,有效提高检测效率。  整个操作过程耗时短(30秒左右),而且其适用范围广,操作方便,净化效果好,检测结果准确。在操作过程中,样品提取液过柱时毒素不被吸附而直接通过,不需要进行活化、淋洗和洗脱操作只需直接上样,短时间内即可完成整个净化过程。回收率可达到85- 100%,有效降低检测成本。 PriboFast○R 系列霉菌毒素净化柱的优势在于整个净化过程样品处理简单,操作简便易行、快速准确、灵敏度高,检测成本低廉, 适合大批量检测,目前在国内的粮油、质检、饲料、监察等系统的多个部门试用后反应效果良好,认为这是实现毒素检测的有效可行的方法之一。 为进一步推广产品,扩大市场影响力,感谢广大新老用户对泰乐祺科技的支持与厚爱,我公司现开展PriboFast®霉菌毒素多功能净化柱产品的免费申请试用活动。您只要下载填写产品试用申请表(耗材类),看看什么产品对您的实验有帮助,然后将产品试用申请单填好后传真、邮件或邮寄给我公司,我公司将会给您寄出试用装,欢迎各位老师来电咨询。 PriboFast®霉菌毒素多功能净化柱试用产品包括: PriboFast®M260多功能净化柱 用于黄曲霉毒素 玉米赤霉烯酮PriboFast®M200多功能净化柱 适用于呕吐毒素及其衍生物 雪腐镰刀菌烯醇等毒素 北京泰乐祺科技有限公司目前提供食品安全检测相关产品和技术服务,尤其专注于霉菌毒素分析系列产品和技术服务,依托国外先进技术为社会提供食品、饲料及饮料等的霉菌毒素、食品成分等检测分析服务。 ☆ 霉菌毒素检测技术咨询与产品服务 包括:标准品、标准参考物质(质控样品)、样品前处理净化柱和免疫亲和柱、ELISA试剂盒 ☆ 酶法生物分析试剂盒(液体装)及葡萄酒专用酶法试剂盒 ☆ 动物疾病金标检测卡和ELISA检测试剂盒 ☆ 农药、环境污染物质等样品前处理净化柱 ☆ 农兽药食品标准品以及固相萃取小柱、滤膜、针式过滤器等色谱耗材 ☆ 霉菌毒素、有机酸、糖类物质等检测分析 北京泰乐祺科技有限公司 www.rapid-bio.com 联系电话:010-63395349 63380700 13311089404 如有更多产品需求与查询,请及时接洽:www.rapid-bio.com 或在我公司查询主页客户留言处(http://www.rapid-bio.com/NetBook.asp#)留下您的查询内容,我们即会在当天为您作出回复。
2012-4-26 16:08:00
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