逐典Chaselection-重组胰蛋白酶使用常见问题答疑

Q1：逐典重组胰蛋白酶配置是否需要过滤?

A1：需要使用0.22μm滤膜除菌过滤，这个在母液配置和工作液（即稀释后）的配置中都是需要的。

Q2：逐典重组胰酶产品是否是无菌产品？

A2：不是无菌产品，产品COA中是微生物限度标准为100CFU，所以在配置使用前需要进行无菌过滤。

Q3：逐典重组胰蛋白酶的配置有哪些环节？分几步？

A3：重组胰酶从干粉到能直接使用的工作液需要两大环节。第一步：需要配置成低PH的母液，除菌过滤；第二步：再进行中性缓冲液稀释，过滤除菌后就能直接使用了。

Q4：逐典重组胰酶的主要优点是那些？

A4：非动物来源、GMP环境生产、高酶活、高稳定性。

Q5：逐典重组胰酶的建议使用浓度是多少？

A5：配置母液的浓度是10 mg/ml，配置工作液浓度是0.5 mg/ml。

Q6：逐典重组胰酶产品如何保存？干粉？母液？工作液？

A6：一般来说，我们的干粉产品 -20℃保存 2年没有问题， 配成母液-20℃保存 1年没有问题，工作液的话-20℃保存 1-3个月没有问题，临时用放在4℃可保存一周内，但还是建议客户现用现配。

Q7：消化细胞的胰酶是不是浓度越高越好？

A7：不是的，一般来说消化细胞会有一个最佳胰酶浓度，达到最适浓度后浓度升高会伤害细胞。

Q8:细胞消化时间长是不是意味着胰酶产品性能不行？

A8:一般的细胞消化时间3-5min都是很正常的，难消化的细胞10-15min也是存在的。 细胞消化时间长短不能完全决定产品性能，产品的比活、活性、级别、生产技术、以及质量标准等因素都是评判产品性能的条件。

Q9:如何控制胰酶消化时间？

A9:不同细胞对消化液的敏感性不同，胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度，是否含EDTA，胰酶的储存时间，胰酶的储存温度，是否反复冻融，消化加入的胰酶体积，消化温度及细胞的密度有关。

Q10:新细胞如何使用胰酶消化？

A10:消化对于新购买的细胞，建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间，可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆，记录最佳消化时间，下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。

Q11:使用胰蛋白酶的时候加入EDTA是为什么？

A11: EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子，以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建议胰蛋白酶处理细胞前，用EDTA清洗细胞，以消除来自培养基中所有的二价离子。