人维生素DELISA检测试剂盒原理与组成部分

人维生素DELISA检测试剂盒原理：
试剂盒采用双抗体步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被维生素D（VD）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的维生素D（VD）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

人维生素DELISA检测试剂盒注意事项：
1.  试剂盒保存在2-8℃，使用室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.  浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.  所有液体组分使用充分摇匀。

人维生素DELISA检测试剂盒组成部分：
1、人1,25二羟基维生素D3elisa检测试剂盒酶和底物：在ELISA中zui常用的酶为HRP和ALP。

2、抗体：在ELISA中应用的抗体可分为多克隆抗体(多抗)和单克隆抗体(单抗)。

3、抗原：在ELISA中应用的抗原要求有较高的特异性、亲和力和纯度。主要有三类，即自然抗原、人工合成抗原和基因重组抗原。

4 、人维生素DELISA检测试剂盒包被：将免疫活性物质(抗原或抗体)结合于固相载体上的过程称为包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纤维薄膜等；常用的方法有吸附法、化学交联法及亲和素-生物素间接包被法

5、固相载体：固相载体是ELISA中用以分离结合标记物和游离标记物的主要手段，应与各种免疫活性物质有良好的结合性能并且不改变其免疫活性。常用的固相载体有聚苯乙烯塑料和硝酸纤维素膜。