整合HBV基因组的肝癌细胞Hep 3B2.1-7培养与防护
关键词：Hep 3B2.1-7，HBV基因组，细胞培养
做乙肝相关肝癌、HBsAg 或者肝细胞癌方向的同学，Hep 3B2.1-7 是一株很有价值的模型。它整合了完整的乙肝病毒基因组，是研究 HBV 与肝癌关系的经典工具。
Hep 3B2.1-7 是人肝癌细胞，来自一名 8 岁黑人肝癌患者的肝组织。它表达 AFP、HBsAg、白蛋白、转铁蛋白、铜蓝蛋白等，整合了完整乙肝病毒基因组，在裸鼠中能致瘤，可用于 3D 培养、癌症、传染病和毒理学研究。
细胞背景与来源
来源：人，肝癌（8 岁黑人患者）。贴壁生长，贴壁较弱。
应用场景与研究价值
- 肝癌研究：肝细胞癌发生、增殖与 HBV 相关性肝癌机制。
- 传染病学：HBV 基因组整合、HBsAg 表达与病毒-宿主互作研究。
- 标志物/药物：AFP、HBsAg 等标志物及抗病毒、抗肿瘤药物研究。
培养特性与注意事项
培养基：EMEM（MEM + NEAA）+ 10% FBS + 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。不建议用高糖 DMEM，可能导致形态改变。
传代：PBS 润洗后胰酶 37℃ 消化（贴壁弱、消化时间偏短），回缩、间隙变大但未脱落时加完全培养基终止，别强行吹下；1000 rpm 离心 3 min；推荐 1:2。换液 2 天一次。
冻存：92% FBS + 8% DMSO（或 92% 完全培养基 + 8% DMSO），程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏：37℃ 水浴 2 min 内，150g 离心 2 min。生物安全：BSL-2（整合完整 HBV 基因组，须按二级生物安全防护操作）。
注意：对消化极敏感，消化过头或吹打重会形态异常、长不动；贴壁弱，运输低温、室温久置、试剂过冷会回缩变粗，放回培养箱静置能恢复；黑点多，用预热 PBS 轻润洗。
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