Kasumi-1细胞AML1-ETO融合基因与20%血清培养
关键词：Kasumi-1，AML1-ETO，血清培养
做急性髓系白血病（AML）尤其是 t(8;21) 转位方向的同学，Kasumi-1 是绕不开的模型。它携带 AML1-ETO 融合基因，是研究这类白血病发病机制和靶向治疗的经典工具。
Kasumi-1 是人急性原粒细胞白血病细胞，从一名亚洲男性 AML 患者外周血分离的成髓细胞。它有 8:21 染色体转位，使 AML1-ETO 融合基因高表达；髓过氧化物酶阳性，显示髓性成熟形态。
细胞背景与来源
来源：人，急性髓系白血病外周血。悬浮生长，呈圆形或聚团；圆形透亮、膜完整的细胞是活细胞，拿不准可用台盼蓝染色计数确认活率。
应用场景与研究价值
- 白血病研究：AML1-ETO 融合基因、t(8;21) 白血病发病机制研究。
- 分化/因子应答：对 IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF 响应，研究造血调控；PMA 可诱导巨噬细胞样分化。
- 药物筛选：抗白血病药物活性评价。
培养特性与注意事项
- 培养基：RPMI 1640 + 20% FBS + 1% 双抗——血清比例是 20%，不建议降低。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。生长较慢，需耐心。
- 传代/换液：接种密度约 50 万细胞/mL，密度到 80 万/mL 时 1:2 传代。状态差时别离心，用半换液法；离心 900-1000 rpm、3 min。悬浮细胞偏脆弱，吹打轻、转速别太高。
- 冻存：92% FBS + 8% DMSO（或 92% 完全培养基 + 8% DMSO），冻存难度较大，密度 200-300 万细胞/mL/管，程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏：37℃ 水浴约 1 min，尽快离心去 DMSO。生物安全：BSL-1，人源细胞建议按 BSL-2 防护操作。
- 注意：血清含量保持 20% 别降；碎片多时密度大时低速离心（900 rpm、3 min）去除，密度低时别离心；融化后尽快离心除 DMSO，避免损伤。
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