小鼠Elisa试剂盒原理与处理方法
浏览次数:340 发布日期:2021-1-11
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小鼠Elisa试剂盒原理:
采用竞争法测定金黄地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL水平。用金黄地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL抗原包被微孔板,制成固相载体,实验时依次在微孔板中加入标本及标准品,并加入HRP标记的OXLDL抗体,标本及标准品中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。反复洗涤后加底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,再用硫酸终止反应,转变成黄色。标本中抗体量越多,结合在固相上的酶标抗体愈少,颜色越浅。颜色的深浅和样品中的OXLDL含量呈负相关。采用酶标仪在450nm波长测定吸光度(OD值),根据标准曲线,计算测试样品中OXLDL浓度。
小鼠Elisa试剂盒样本处理及要求:
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响zui后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
OxLDL ELISA检测试剂盒结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的AGEs标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的AGEs含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-800ng/ml
4、敏感度: 1.0 ng/ml