西美杰独家病毒包装方案:五大流程,一个对策!
不论是细胞治疗还是基因治疗都离不开病毒载体。目前使用最多的病毒载体类型包括:腺相关病毒(AAV)、慢病毒(Lv)、逆转录病毒(Rv)和腺病毒(Adv)等,这些常用病毒载体特性如下图所示:
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特征 |
慢病毒 Lentivirus |
逆转录病毒 Retrovirus |
腺相关病毒 AAV |
腺病毒 ADV |
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基因表达 |
稳转/瞬转 |
稳转 |
瞬转 |
瞬转 |
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是否能感染可分裂的细胞 |
是 |
是 |
是 |
是 |
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是否能感染不分裂的细胞 |
是 |
是 |
否 |
否 |
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是否能整合到靶细胞基因组 |
是 |
是 |
否 |
否 |
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靶细胞的免疫反应 |
低 |
较低 |
非常低 |
高 |
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病毒滴度 |
+++ |
++ |
+++ |
++++ |
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转染效率 |
+++ |
++ |
+++ |
++++ |
因此在选择病毒载体时,除了要考虑载体自身特征之外,如何包装并获取高滴度高活性的病毒载体对后续实验至关重要,针对病毒载体制备5大环节,小美为您推荐如下解决方案↓

1. 病毒载体包装质粒系统
西美杰代理的美国Cell Biolabs公司推出的病毒包装系统可满足多种重组病毒包装需求,包括四大类型病毒包装质粒AAV Helper Free System、ViraSafe™ Lentivirus Expression Complete Systems、Platinum Retroviral Expression Systems以及RAPAd® Adenoviral Expression Systems等。更多病毒包装质粒系统介绍请点这里。
2. 病毒包装试剂
A. 病毒包装专用转染试剂
西美杰代理的美国Mirus公司新推出的病毒包装专用转染试剂TransIT®-VirusGEN™与TransIT®-Lenti系列,专门针对AAV和Lentivirus设计,相比传统转染方法能获得更高的转染效率和病毒滴度,无动物源成分且兼容多种病毒包装系统及不同细胞系类型。
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品名 |
货号 |
规格 |
适用病毒类型 |
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TransIT®-VirusGEN™ Transfection Reagent |
MIR 6703 |
0.3/0.75/1.5mL |
AAV & Lentivirus |
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TransIT®-Lenti Transfection Reagent |
MIR 6603 |
0.3/0.75/1.5mL |
Lentivirus |
B. Lv/Rv包装效率增强剂Lentivirus/Retrovirus 10X Titer-Up
西美杰独家代理的101Bio品牌Lentivirus/Retrovirus 10X Titer-Up用于重组慢病毒或逆转录病毒包装过程,可促进病毒基因组转录和RNA稳定,使转染效率提高10倍左右。
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品名 |
货号 |
规格 |
适用病毒类型 |
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Lentivirus 10X Titer-Up |
P906 |
1 mL |
Lentivirus |
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Retrovirus 10X Titer-Up |
P909 |
1 mL |
Retrovirus |
C. AAV/Adv病毒释放液Virus-High® AAV/ADV Release Solution
西美杰独家代理的101Bio品牌Virus-High® AAV/ADV Release Solution是一款无需反复冻融,即可从细胞中快速高效收获AAV/Adv病毒以及其他非分泌型无囊膜病毒的试剂。
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品名 |
货号 |
规格 |
适用病毒类型 |
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Virus-High® AAV / Adv Release Solution |
P900 |
10 mL |
AAV & Adv |
3. 高效快速病毒浓缩试剂与纯化试剂盒
西美杰独家代理的美国Cali-bio和Cell Biolabs品牌专门针对病毒载体设计的高效重组病毒浓缩纯化试剂(盒),在获得重组病毒高回收率的同时大大简化操作流程,无需超速离心设备,是中小规模样本纯化的首选方案。
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重组病毒类型 |
品名 |
货号 |
特点 |
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逆转录病毒 (Retrovirus) |
Retrovirus Concentration Solution(5×) 逆转录病毒浓缩试剂 |
CB300904 |
无需超速离心; 1小时内病毒浓缩10-100倍; 浓缩后病毒适用于各种细胞; |
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慢病毒 (Lentivirus) |
Lentivirus Concentration Solution(5×) 慢病毒浓缩试剂 |
CB300905 | |
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ViraBind™ Lentivirus Purification Kit |
VPK-104 |
操作时间< 2h,无需超速离心; | |
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回收率>90%,纯化效果与CsCl方法相当 | |||
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腺相关病毒 (AAV) |
ViraBind™ AAV Purification Kit (适用样本量为2个10cm皿或1个15cm皿收获的上清) |
VPK-140 |
适用于纯化AAV-2与AAV-DJ; 操作时间约3h; |
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ViraBind™ AAV Purification Mega Kit (一次处理样本量可达10个15cm皿收获的上清) |
VPK-141 |
获得AAV纯度>95%,回收率>60% | |
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腺病毒 (ADV) |
ViraBind™ Adenovirus Miniprep Kit (适用样本量为1个T75瓶或1个10cm皿收获的上清) |
VPK-099 |
采用特殊滤膜和离心柱; 操作时间约30min,无需超速离心; |
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ViraBind™ Adenovirus Purification Kit (适用样本量约为4个T75瓶收获的上清) |
VPK-100 |
回收率>90%,纯化效果与CsCl方法相当 |
4. 病毒滴度检测试剂盒
精确测定重组病毒滴度是提高下游实验可控性,重复性和准确性的前提,西美杰代理的Cell Biolabs品牌针对不同病毒载体的特性分别设计的了多种滴度测定试剂盒,并且兼容了高效和精确的测定方法。
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重组病毒类型 |
品名 |
货号 |
特点 |
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慢病毒 (Lentivirus) |
Lentivirus Rapid Quantitation Kit |
VPK-112 |
快速定量,操作过程45-60min; 荧光法检测病毒核酸浓度定量病毒滴度,纯化前或纯化后样品都可检测; 灵敏度:1010个病毒粒子/mL或100ul纯化前上清 |
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Lentivirus-Associated p24 ELISA Kit |
VPK-107 |
专利Pull-down技术分离出病毒相关P24蛋白,去除游离P24蛋白; ELISA方法精确定量有活性的重组慢病毒滴度,避免传统方法检测总P24蛋白导致的误差 | |
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Traditional p24 ELISA Kit |
VPK-108-H |
ELISA方法检测总P24蛋白定量慢病毒滴度 | |
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逆转录病毒 (Retrovirus) |
QuickTiter™ Retrovirus Quantitation Kit |
VPK-120 |
快速定量,操作过程45-60min; 荧光法检测病毒核酸浓度定量病毒滴度,纯化前或纯化后样品都可检测; 灵敏度:1.5×109个病毒粒子/mL或100ul纯化前上清 |
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腺相关病毒 (AAV) |
QuickTiter™ AAV Quantitation Kit |
VPK-145 |
快速定量,操作过程<2h; 荧光法检测病毒核酸浓度定量病毒滴度; 灵敏度:纯化前AAV可达109 GC/mL,对于纯化后AAV可达5×1010 GC/mL |
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腺病毒 (ADV) |
QuickTiter™ Adenovirus Quantitation Kit |
VPK-106 |
快速定量,操作过程45-60min; 荧光法检测病毒核酸浓度定量病毒滴度,纯化前或纯化后样品都可检测; 灵敏度:1010个病毒粒子/mL或100ul纯化前上清 |
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QuickTiter™ Adenovirus Titer Immunoassay Kit |
VPK-109 |
无需空斑形成实验,避免复杂的铺琼脂步骤,操作更简便; 传统方法10天才可完成的实验,用该试剂盒仅需2.5天,有ELISA和ICC两种方法供选择; | |
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QuickTiter™ Adenovirus Titer ELISA Kit |
VPK-110 |
可用于所有41个血清型的腺病毒 |
5. 病毒感染增强试剂
西美杰代理的Cell Biolabs品牌还针对不同病毒载体研发了专用促病毒感染试剂,能显著提高病毒对靶细胞的感染,进而提高基因表达效率。
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品名 |
货号 |
规格 |
特点 |
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ViraDuctin™ Lentivirus Transduction Kit |
LTV-200 |
40 次 |
复合型试剂能与慢病毒或逆转率病毒形成复合物,与Polybrene®相比病毒感染效率可提高2-6倍,适用于原代细胞和干细胞 |
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LTV-201 |
200次 | ||
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ViraDuctin™ Retrovirus Transduction Kit |
RV-200 |
40次 | |
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RV-201 |
200次 | ||
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ViraDuctin™ AAV Transduction Kit |
AAV-200 |
10次 |
有效提高重组AAV在多种细胞内的转染效率,包括传统方法转导效率低的细胞和非分裂细胞,如原代细胞和干细胞。该试剂使用方便,仅需2h,是AAV转染非分裂细胞的首选。 |
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AAV-201 |
50次 | ||
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ViraDuctin™ Adenovirus Transduction Reagent |
AD-200 |
10次 |
该试剂让重组腺病毒感染不依赖于细胞的CAR(柯萨奇病毒-腺病毒受体)水平,可显著提高病毒感染低CAR或无CAR表达的细胞,如原代细胞或干细胞,还可提高转入基因的表达效率 |
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AD-201 |
50次 |
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