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日本血吸虫PCR检测试剂盒PCR产品特点

浏览次数:293 发布日期:2020-2-20  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
日本血吸虫PCR检测试剂盒PCR产品特点:
引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。
要设计引物首先要找到DNA序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区域单链能形成二级结构,就要避开它。如这一段不能形成二级结构,那就可以在这一区域设计引物。
现在可以在这一保守区域里设计一对引物。一般引物长度为5-30碱基,扩增片段长度为00-600碱基对。
让我们先看看P引物。一般引物序列中G+C含量一般为40%-60%。而且四种碱基的分布随机。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否则P引物设计的就不合理。应重新寻找区域设计引物。
同时引物之间也不能有互补性,一般一对引物间不应多于4个连续碱基的互补。
引物确定以后,可以对引物进行必要的修饰,例如可以在引物的5′端加酶切位点序列;标记生物素、荧光素、等,这对扩增的特异性影响不大。但3′端绝对不能进行任何修饰,因为引物的延伸是从3′端开始的。这里还需提醒的是3′端不要终止于密码子的第3位,因为密码子第3位易发生简并,会影响扩增的特异性与效率。
发布者:上海莼试生物技术有限公司
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