人免疫球蛋白轻链ELISA试剂盒几项具体 操作步骤
浏览次数:366 发布日期:2020-1-2
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人免疫球蛋白轻链lambda(λ-IgLC)ELISA试剂盒 操作步骤
.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
8 ng/L5号标准品50μl的原倍标准品加入50μl标准品稀释液
4 ng/L4号标准品50μl的5号标准品加入50μl标准品稀释液
2 ng/L3号标准品50μl的4号标准品加入50μl标准品稀释液
ng/L2号标准品50μl的3号标准品加入50μl标准品稀释液
0.5 ng/L号标准品50μl的2号标准品加入50μl标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品0μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟.
0.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。