黑色素瘤研究常客 B16，别用高糖 DMEM 是重点

做黑色素瘤、皮肤癌或者肿瘤免疫方向的同学，B16 是经典的小鼠模型。它是 C57BL/6 来源的黑素瘤，接种到同源小鼠体内瘤体呈黑色，黑色素瘤研究里出镜率极高。
B16 是小鼠黑色素瘤细胞，来自 C57BL/6 小鼠皮肤。它黑色素生成阳性，但大部分细胞无色素；有报道称部分培养条件下会大量分泌黑色素。可用于皮肤癌研究，也是合适的转染宿主。
细胞背景与来源
来源：小鼠（C57BL/6），皮肤黑色素瘤。贴壁生长，黑色素生成阳性。
应用场景与研究价值 
 

• 皮肤癌/黑色素瘤：黑色素瘤发生、增殖与转移研究。
• 肿瘤免疫：C57BL/6 同源肿瘤模型、免疫治疗评价。
• 转染宿主。

培养特性与注意事项
培养基：RPMI 1640 + 10% FBS + 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。生长较快，每天看密度和培养基颜色，及时换液或传代（别天天传，控制接种密度让传代频率约 2 天一次）。
 
传代：PBS 润洗后胰酶 37℃ 消化，细胞明显回缩、间隙变大、部分脱落时加完全培养基终止，1000 rpm 离心 3 min；推荐首次 1:2，长到 80% 立即传。换液 2 天一次。
冻存：92% FBS + 8% DMSO（或 92% 完全培养基 + 8% DMSO），程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏：37℃ 水浴 2 min 内，150g 离心 2 min。生物安全：BSL-1。
注意：不建议用高糖 DMEM 培养，会促进黑色素分泌（尚恩确认用 DMEM 培养出现过大量黑色素表达）；密度过高过低都影响状态，低则长得慢、高则易分泌黑色素；背景黑点多为代谢产物和碎片，多了 PBS 润洗或换液。
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