T84 结肠癌肺转移细胞，岛状生长和超长消化时间要心里有数

做肠上皮屏障、离子转运或者结肠癌转移方向的同学，T84 是个用得挺多的模型。它是从结肠癌肺转移灶建立起来的，特别擅长维持载体电解质转运，很适合研究肠道上皮功能。
T84 是人结肠腺癌肺转移细胞，从一位 72 岁男性结肠癌患者的肺转移灶取组织、皮下接种裸鼠连续移植后建立，裸鼠传代 23 代后建系，始终保持结肠癌原始组织性状。它有很多肽类激素和神经递质受体，能维持电解质转运，可用于 3D 培养和癌症研究。
细胞背景与来源
来源：人，结肠腺癌的肺转移灶。贴壁生长，呈岛状/片状/块状生长（这是它的特性，不是聚团，不用管），细胞间连接紧密、有桥粒，角蛋白阳性。
应用场景与研究价值 
 

• 肠道屏障/转运：单层紧密连接形成、电解质与离子转运研究。
• 信号受体：肽类激素、神经递质受体功能研究。
• 癌症转移：结肠癌肺转移机制与 3D 培养。

培养特性与注意事项
培养基：DMEM + 10% FBS + 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。贴壁，生长较慢，接种密度别太低，推荐 1:2，传代周期 3-4 天。
 
传代：PBS 润洗 1-2 遍后胰酶 37℃ 消化，参考 5-15 min（种得越久/密度越大消化越久），部分脱落时先用胰酶吹下细胞再加培养基终止，1000 rpm 离心 3 min。换液 2 天一次。
冻存：92% FBS + 8% DMSO（或 92% 完全培养基 + 8% DMSO），程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏：37℃ 水浴 2 min 内，150g 离心 2 min。生物安全：BSL-1，人源细胞建议按 BSL-2 防护操作。
注意：贴壁慢，传代/复苏后约 48 h 才贴壁，建议 48 h 后再换液；背景黑点是代谢产物和碎片，多了 PBS 润洗或换液；有部分漂浮细胞属正常，过多时换液清掉；70%-80% 密度时实际数量已经很多，要传代。
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