多模式层析填料在胶原蛋白纯化中的应用

文章来自博格隆 www.bestchrom.cn

博格隆的多模式层析填料兼具离子交换作用、疏水作用和氢键作用机制，表现出优秀的分辨率，又因其独特机制能够耐受较高电导的样品上样，常用于酵母或动物细胞培养上清中的重组胶原蛋白纯化，以及大肠杆菌破碎液中胶原蛋白的高效分离。本文聚焦博格隆多模式层析介质在重组胶原蛋白纯化中的应用。

Fig.1 胶原蛋白层析介质选择策略
 

博格隆MMC系列产品包括Diamond MMC和Diamond MMC Mustang，下表列出了两款填料的技术参数：

Table 1. Diamond MMC和Diamond MMC Mustang技术参数

对比两款MMC产品参数，Diamond MMC粒径大、离子载量高，适用于澄清料液中胶原蛋白的纯化；Diamond MMC Mustang粒径小，具有更高的分辨率，可用于需去除胶原蛋白降解片段的粗纯或精纯步骤。两款填料均具备耐高盐上样的特点。
 

样品：电导35.16mS/cm，pH3.0

Fig.2 Diamond MMC层析纯化图谱

在此案例中，目标分子有较严重的降解，经过优化洗杂和洗脱电导和pH条件，最终去除降解片段和杂质蛋白，获得纯度94.95%重组胶原蛋白组分。

样品：用水稀释2倍，调节电导为21.23mS/cm，pH4.0

Fig.3 Diamond MMC Mustang层析纯化图谱

在本案例中，上样电导高达21.23mS/cm，无目标蛋白流穿；经两步洗杂效果明显，最终通过盐线性梯度洗脱，获得高纯度重组胶原蛋白。
 

多模式层析介质凭借其多种作用机制，具有耐高盐上样和高分辨等特点，适用于重组胶原蛋白的一步层析工艺设计，或两步层析中的精纯实现高纯度胶原蛋白生产。随着重组胶原蛋白产业发展，博格隆多模式层析介质以其高效、灵活的特点，将在其中扮演重要角色