正确更换细胞培养基类型的情况分析与方法介绍

选择一种合适的细胞培养基是每个实验猿的必get技能。不同类型的培养基可以支持同一种细胞的生长，怎么选择最佳款？假如自己的培养基刚好用完了，可以借别人的培养基用用吗？刚买了细胞，能继续使用以前剩余的培养基吗？

间充质干细胞可以用基础培养基,加常规血清培养吗？

间充质干细胞的原代培养条件严格，对使用的血清和添加物都非常敏感，并非单纯的DMEM或者F12等基础培养基加常规血清所能替代。所以在培养细胞前，需要考虑该细胞培养是否需要添加特殊的成分，并且要做足预实验，选取最适合细胞生长的培养体系。

如赛业Oricell^®提供的各类干细胞专用培养基，经16年干细胞培养经验的筛选优化，培养基添加了适合干细胞生长的优级胎牛血清，以及干细胞相关生长因子和非必须氨基酸能满足满足干细胞传代增殖生长中需要的特殊养分。
 

细胞复苏后换了一种培养基，影响大吗？

短期内接触不同培养基对绝大部分细胞来讲影响并不大。比如，我们日常工作中同时操作的细胞有很多，如果需要同时复苏多株细胞，用同一种培养基洗涤是完全没有问题的，但是长期培养就不行了。

我们培养的细胞长期适应了某一种培养体系，代谢已经有了适应性，冒然更换培养基可能会对细胞形态、增殖和蛋白表达产生影响。不同厂家的培养基，即使宣称同某一个细胞适用，配方也略有差异。细胞库不同，建系的培养信息不同，一般厂家会建议使用自供的配套培养基以获得理想的培养效果。所以，某一培养体系下的某一株细胞表现型让我们满意，如果不是实验必要，就不要轻易更换培养基种类。
 

不同培养基养同一种细胞，形态不一样正常吗？

这种情况是正常的。如上所述，当细胞培养条件发生改变时，细胞的性质会发生变化。
 

特殊情况下真必要更换培养基，该如何正确操作呢？

① 在不确定新培养基是否合适细胞生长的情况下，实验前预先“保种”。

② 直接替换可能会造成细胞死亡，建议逐步进行，密切观察细胞长势和形态，让细胞安全度过“适应期”。

尝试使细胞慢慢适应新培养基

▷  以1:2的比例传代到新培养瓶中。

▷ 如果细胞形态一致，传代培养下一代细胞时，细胞1:2分配，培养基采用1:3的比例（25%原培养基，75%新培养基）。

▷ 如果细胞形态一致，传代培养下一代细胞时，细胞1:2分配，培养基采用1:7的比例（12.5%原培养基，87.5%新培养基）。

▷ 如果细胞形态一致，传代培养下一代细胞时，细胞1:2分配，培养基全部换新培养基。

有时候传一代不能真实反映细胞适应了新培养环境，最好是每进行一次更换多传个一两代。

③ 更换培养基后优先使用同品牌、同等级、同批次的血清，或者预筛选合适的血清。
 

若已经储备了昂贵的胎牛血清，想自行配置培养基又该如何操作呢？

① 询问厂家该细胞推荐的培养体系，如ATCC来源细胞可直接查询该细胞的培养条件介绍和正常形态。
② 翻阅文献配方，要不要添加其他因子之类的特殊成分，但要注意该文献的研究条件是否与你实验相符。
③ 配制几种不同类型的培养基，使用同一批次细胞进行对比，观察形态差异。或购买少量其他成品化培养基，与自己配制的进行对比，观察形态差异。
④ 现行条件下的细胞生长缓慢，可以适当增加血清比例。
 

赛业OriCell^®的培养基产品怎样配制？

完全培养基产品分为非即用型和即用型两类，可按需选用。

非即用型
按比例分装，使用时只需将基础培养基、血清、因子等全部混合即可。需要注意，部分成分体积较小、浓度较高，在运输、冻融过程可能析出或粘附在管壁、管盖上。配之前，请务必离心后，吹打混匀再吸取。最好在吸取后使用培养基洗涤装因子的管内壁，确保没有成分损失。

另外，有些成分析出后较难复溶，如L-谷氨酰胺、ITS等，可在37℃水浴内震荡或者吹打溶解。即使还有少量小颗粒无法溶解，请直接加入基础培养基中，成分浓度低时较易溶解。

即用型
添加了更稳定的添加物，省去分装操作，即开即用。