人细胞株步骤方法与注意事项

人细胞株​注意事项：

1、培养基于4℃条件下可保存3-6个月；

2、在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作；

3、传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态；

4、如果您的实验时间较长， 请在收到细胞后传代时，按细胞量分种2瓶，使用其中的一瓶细胞实验，其余的细胞先冻存起来。下次实验需要时，再复苏；

5、该 NK-92细胞，人细胞株，培养技术只可用于科研。

6、需要更多信息，请致电 ！

人细胞株步骤： 

（1）操作人员应戴防护面罩及手套，防止冷冻管可能爆裂之伤害。 

（2）自液氮或干冰容器中取出冷冻管，检查盖子是否旋紧，由于热胀冷缩过程，此时盖子易松掉。

（3）将新鲜培养基置于37℃水槽中回温，回温后喷以70%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。

（4）取出冷冻管，立即放入37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，以70%酒精擦拭保存管外部，移入无菌操作台内。 

（5）取出解冻之细胞悬浮液，缓缓加入有培养基之培养容器内（稀释比例为1：10～1：15），混合均匀，放入CO2培养箱培养。取0.1ml解冻细胞悬浮液作存活测试。

（6）解冻后是否立即去除冷冻保护剂（例如DMSO或glycerol），依细胞种类而异，一般而言，大都不需要立即去除冷冻保护剂。惟若要立即去除，则将解冻之细胞悬浮液加入含有5-10ml培养基之离心管内，离心1000rpm，5分钟，移去上清液，加入新鲜培养基，混合均匀，放入CO2培养箱培养。 

（7）若不需立即去除冷冻保存剂，则在解冻培养后隔日更换培养基。