急速裂解法去除红细胞

急速裂解法去除红细胞      

器材和试剂： 
所有直接接触细胞的用品和试剂必须无菌。
1. 标注体积刻度的试管（圆锥形底）；
2. 巴斯德吸管（短型和长型）；
3. 台式离心机；
4. 培养级纯净水；
5. 2×Hanks平衡盐溶液；
6. 储存培养基，含10%血清；

实验方法：
1. 1000r/min离心原代细胞悬液5min，弃上清；
2. 向细胞沉淀中加入10ml培养级水，并用移液管轻轻来回吹打数次以重悬细胞（注：不同细胞的抗低张能力不同，控制暴露时间低于15s）；
3. 迅速加入等体积的2×Hanks平衡盐溶液恢复张力，用巴斯德吸管轻轻混匀细胞悬液；
4. 再次1000r/min离心5min，检查红细胞沉淀。如果红细胞仍大量存在，重复该步骤。否则在储存培养基中重悬洗涤过的细胞；
5. 计数及检测细胞活力后，放培养箱培养；