密度梯度分离法分离单个核细胞（MNCs）

密度梯度分离法分离单个核细胞（MNCs）

试剂和材料：
1. 合适的培养基或冷冻液；
2. PBSA；
3. Ficoll-Hypague；
4. 巴氏吸管；
5. 50ml离心管；

实验方法：
1. 将脐血样品用PBSA按1：1比例稀释；
2. 将15ml Ficoll-Hypague吸入50ml离心管；
3. 将30mlPBSA稀释的脐血样品缓慢地加到Ficoll-Hypague上；
4. 室温450g离心20-30min；
5. 离心后，在Ficoll-Hypague液面上明细可见一层细胞，是密度低于Ficoll-Hypague液的单个核细胞层；
6. 用巴氏吸管，将单个核细胞层吸出，转移到另一离心管中；
7. 用PBSA洗细胞，室温200g离心10min；
8. 倒掉上清，用PBSA重悬细胞，洗细胞，重复上述步骤7；
9. 最后，用合适的培养基重悬细胞（冰冻液或培养基）；