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基因过表达载体构建服务
基因过表达,是将目标基因递送到宿主细胞中,使该基因过量表达。基因过表达广泛用于基因功能研究、疾病模型构建、药物筛选、蛋白质生产以及基因治疗等方向。
服务类别:分子与细胞总访问:270
最后更新:2025-8-5半年访问:61
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服务商: 广州艾迪基因科技有限责任公司 查看该公司所有服务 >>
  • 服务介绍
  • 公司简介
▍基因过表达载体构建
基因过表达,是将目标基因递送到宿主细胞中,使该基因过量表达。基因过表达广泛用于基因功能研究、疾病模型构建、药物筛选、蛋白质生产以及基因治疗等方向。
 
▍服务详情
艾迪基因基于多年的细胞生物学经验,建立了一套成熟的基因过表达载体构建实验体系。可以提供稳定过表达载体或瞬时过表达载体等构建服务。我们可采用慢病毒转导方法,将不超过5 kb的外源基因高效整合到宿主细胞基因组中,并在多次传代后仍保持稳定的表达效果。此外,我们还可应用转座子方法,实现超过5 kb目的基因在细胞内的长期稳定表达。
服务类型 慢病毒稳定过表达载体构建/转座子稳定过表达载体构建/瞬时过表达载体构建/其他特殊需求的载体构建
交付标准 1.质粒图谱
2.质粒测序结果
3.质粒扩增操作说明
4.质粒
周期 快至2周
价格 1000元起 ;具体可来电咨询18102225074
 
▍服务优势
 
▍服务类型
可根据客户需求,综合基因等情况,进行基因过表达载体的设计和构建。
1. 慢病毒稳定过表达载体构建
2. 转座子稳定过表达载体构建
3. 瞬时过表达载体构建
4. 其他特殊需求的载体构建
 
▍质粒图谱
 
Lenti 过表达慢病毒质粒图谱
 
pPB 过表达转座子质粒图谱
 
 
▍ FAQ
1、如何选择合适的载体类型?
选择载体时,应考虑实验的目的和宿主细胞的类型。例如,质粒载体常用于细菌中基因的表达或扩增,病毒载体则更适合用于哺乳动物细胞中的基因转导。除此之外,载体的启动子、复制子以及抗生素选择标记也需要根据具体需求进行选择。
 
2、艾迪基因载体构建的宿主菌是什么?顾客可以使用什么类型菌株来扩增质粒载体?
载体在进行扩增时,通常会使用大肠杆菌(E. coli)菌株来进行。在实验操作中,常用的大肠杆菌菌株是DH5α。DH5α适用于大多数非重组型载体。对于重组型载体,如慢病毒载体和转座子载体等,可以使用Stbl3菌株进行扩增。Stbl3是一种特殊的大肠杆菌(E. coli)菌株,来源于,HB101 E. coli strain,其基因组含有重组酶recA13突变,这可以有效地抑制长片段末端重复区的重组,从而降低错误重组的概率。
▍参考文献
1. SKOV3 和 OVCA420 细胞系中过表达lnc-CTSLP8
The lnc-CTSLP8 upregulates CTSL1 as a competitive endogenous RNA and promotes ovarian cancer metastasis
卵巢癌具有高度致死性且预后不良,其原因是转移。长链非编码RNA(lncRNA)在肿瘤发展中起关键作用,但在卵巢癌转移中的作用尚不明确。研究者通过公共数据库(TCGA和GEO)分析并通过qRT-PCR验证lnc-CTSLP8在卵巢癌中的表达。利用慢病毒载体和CRISPR/Cas9系统构建lnc-CTSLP8过表达和敲除细胞系,分析细胞增殖、迁移和侵袭。在体内研究中,使用卵巢原位肿瘤小鼠模型,观察细胞中的自噬和EMT标志物,并通过RNA免疫沉淀和双荧光素酶报告基因实验确认lnc-CTSLP8与miR-199a-5p的相互作用。结果发现lnc-CTSLP8在转移性卵巢癌中高表达,过表达促进卵巢癌的发展并增强自噬和EMT。机制上,lnc-CTSLP8作为竞争性内源RNA上调CTSL1并表现出致癌效应。CTSL1抑制剂和miR-199a-5p过表达消除了lnc-CTSLP8过表达的效果。研究表明lnc-CTSLP8作为ceRNA在卵巢癌中起作用,是潜在的治疗靶点。
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