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基因敲除技术，可精准地去除或失活特定基因。构建基因敲除的细胞模型，可揭示基因在生物体中的功能，并在药物靶点筛选、药物开发等领域有广泛的应用。
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| 服务商： 广州艾迪基因科技有限责任公司 | 查看该公司所有服务 >> |
基因敲除细胞基因敲除技术，可精准地去除或失活特定基因。构建基因敲除的细胞模型，可揭示基因在生物体中的功能，并在药物靶点筛选、药物开发等领域有广泛的应用。现有的基因编辑工具有CRISPR/Cas9、TALENs或ZFNs等。目前，CRISPR/Cas9系统因其高效性和操作便捷性，已成为基因敲除的首选工具。该系统通过gRNA引导Cas9核酸酶，对目标DNA进行特异性的识别和切割，产生DNA双链断裂（DSB）。随后，细胞通过非同源末端连接（NHEJ）途径修复这些双链断裂。在修复过程中，常常会产生非三倍数的插入或缺失（indel），导致移码突变，进而实现基因敲除。
▍ 案例分析
图1 抗性浓度摸索
（2）单克隆细胞A2的目的基因在sgRNA2位置发生突变，插入1个碱基，在新序列的第340位碱基提前出现终止密码子。
▍ 服务详情
| 细胞类型 | 各种细胞类型，包括肿瘤、常规、干细胞、原代和永生化细胞系 |
|---|---|
| 服务类型 | 单基因敲除/多基因敲除/移码突变/片段敲除 |
| 交付标准 | 基因敲除单克隆细胞≥1株（2管细胞/株，1×106/管）；项目结题报告 |
| 周期 | 现货1周 （查看现货）；定制快至4周 |
| 价格 | 4980元起 ；具体可来电咨询18102225074 |
▍ 成功案例
根据客户需求，综合靶基因和细胞的情况，针对性地设计了基因敲除方案。
| 细胞 | 基因名 (ID) | Cell pool敲除率 |
| MH-S | Sirt2 (64383) | ★★★★★ |
| HEPG2 | MAP1S (55201) | ★★★★★ |
| BHK-21 | TMEM41b (101842799) | ★★★★★ |
| KGN | TFE3 (7030) | ★★★★★ |
| LLC | CILP (214425) | ★★★★★ |
| MDA-MB-231 | OLFML2A (169611) | ★★★★★ |
| ID8 | DUSP1 (19252) | ★★★★★ |
| HmrSv5 | FN1 (2335) | ★★★★★ |
| huh7 | EGFL9 (65989) | ★★★★★ |
| MKN28 | TRIM54 (57159) | ★★★★★ |
| MB49 | STUB1 (56424) | ★★★★★ |
| hela | TRAPPC2（6399） | ★★★★★ |
| L929 | RIPK1（19766） | ★★★★★ |
| Bv2 | PKM（18746） | ★★★★★ |
| caco-2 | PEPT1（6564） | ★★★★★ |
| MOC2 | Itga5（16402） | ★★★★★ |
| PC3 | HJURP（55355） | ★★★★★ |
| CFSC-8B | Rock2 (25537) | ★★★★★ |
| HT22 | DJ-1 | ★★★★★ |
| A549 | PKM1（5315） | ★★★★★ |
| kupffer | sirt6（50721） | ★★★★★ |
| HBMEC | S100A6(6277) | ★★★★★ |
| Mia PaCa-2 | MMP1（4312） | ★★★★★ |
| HLE B3 | PXDN | ★★★★★ |
| HepG2/Dox | PIK3CA（5290） | ★★★★★ |
| HEK293 | DDR1（780） | ★★★★★ |
| RPE1 hTERT p53-/- Cell | BMF（90427） | ★★★★★ |
| HEK293T | WTAP（9589） | ★★★★★ |
敲除效率（%）：★★★★★≥70%；★★★★≥50%；★★★≥30%；★★≥10%
▍ 案例分析
一、抗生素敏感浓度摸索
将细胞如下图1稀释。给药7天后，弃培养液，用台盼蓝染色2 min，显微镜下观察细胞存活情况。确定细胞多克隆细胞筛选和单克隆细胞筛选浓度。
图1 抗性浓度摸索
手机版：基因敲除细胞
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