TNBS溶液
包装规格:
1ml 10ml in glass bottle
产品简介:
结肠炎诱导剂TNBS(2,4,6-三硝基苯磺酸溶液),浓度5%w/v(Colitis-inducing agent TNBS)为TNBS的水溶液,是一种常见的炎症性肠病(IBD)动物模型诱导剂。
操作步骤:
1、诱导IBD(炎症性肠病)模型
1. 试剂配制
(1)生理盐水准备:
(2)2%TNBS溶液的配制:取适量5%TNBS溶液,加入无水乙醇和生理盐水,混匀后即得2%TNBS溶液(含 40%乙醇),0.22μm过滤,避光、2~8℃放置备用。
例:需配制2%TNBS溶液5mL,可用5%TNBS溶液2mL+无水乙醇2mL+生理盐水1mL,混匀所得。
2、IBD模型的建立
(1)选取健康 Wistar大鼠为实验对象
(2)给药:各组大鼠分笼饲养,造模前禁食24h,自由饮水。禁食结束后,用阿佛丁工作液腹腔注射麻醉, 使用一次性直肠给药导管导入大鼠距肛门约8cm的结肠内,各组分别缓慢注入2%TNBS溶液,给药剂量为 100mg/kg。在导入药液的时候采取头低尾高的体位,防止灌注液体外溢,并倒提大鼠1min。造模后大鼠平躺,自然清醒,常规饲养。每天观察大鼠的粪便性状、进食情况和精神状态,并记录体重和食重。
注:①动物给药剂量举例:给药浓度为100mg/kg体重时候,动物体重按照200g计算,则给药剂量为 100mg/kg×0.2=20mg,相当于1mL的2%TNBS溶液。
②常用无水乙醇或生理盐水调整给药浓度,从而提高单次给药体积。
注意事项:
1.禁食时间:给药前禁食24h,麻醉给药前用棉签刺激肛门,促进排除末端肠道内粪便。
2. 动物麻醉深度:需要深麻醉,即动物对疼痛刺激无反应才好。
3. 药物浓度:高浓度药物对肠道的刺激更重,容易引起药物外溢。因此采用无水乙醇与生理盐水结肠灌注,就极少有外溢现象。即结肠给药的TNBS溶液中主要包括三个成分:TNBS,乙醇和生理盐水。
4. 给药速度:给药时要匀速缓慢给药,避免引起肠道反射。
5. 给药体积:大鼠0.5~1.5mL,小鼠应该0.05~0.2mL左右。
6. 直肠给药后保持肛门高位1~5min,防止药物流出。
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