类志贺邻单胞菌是兼性厌氧的革兰阴性杆菌,因与志贺菌抗原有交叉反应而得名,是引起肠道感染的病原菌,其核心检测原理围绕生化反应与血清学鉴定展开,是食源性腹泻病原检验的代表菌株。
产品名称:
类志贺邻单胞菌
英文名称:Plesiomonas shigelloides
规格:冻干粉
货号:YS-JZ1427
培养基 营养琼脂:蛋白胨10.0,牛肉浸粉3.0,氯化钠5.0,琼脂15.0,pH7.2±0.2(25℃)
生长条件 37℃;18-24h;好氧;
形态 菌落灰白色,半透明,圆形光滑,G-,杆菌,纯度:纯
分离基物 水体/海产品
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板1-2块;②生物安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取0.5mL无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中200μL/个,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
检测原理:
一、核心遗传背景基础原理
类志贺邻单胞菌属于邻单胞菌属,基因组具备邻单胞菌属保守遗传骨架,兼性厌氧,氧化酶阳性,携带物种特异性核酸标记序列。生化性状遗传稳定,与志贺菌、弧菌等近缘革兰氏阴性杆菌遗传差异明显,可作为菌种鉴定依据。
二、菌株检测与鉴定核心原理
类志贺邻单胞菌检测采用选择性培养基分离培养,生化反应初筛;扩增物种特异性基因,序列比对区分类志贺邻单胞菌与志贺菌、其他邻单胞菌,完成菌种定性鉴定。
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冻干粉菌种复苏中注意事项:
1、冻干粉菌种未活化、需长期储存时,可置于-20℃环境低温保存,保障菌种活性。
2、本冻干菌种为真空冷冻干燥封存状态,冻干管一经开启,菌粉需一次性全部使用,严禁留存二次复用。
3、菌种冻干粉以牛奶为主要保护剂,菌体含量占比低,复苏过程中需将制备的全部菌悬液接种至新鲜培养基,避免因菌体不足导致复苏失败。
4、冻干菌种处于休眠状态,复苏后生长延滞期可能偏长,若未在规定培养周期内长出菌落,可在适配培养环境中延长培养24小时及以上,直至菌落正常生长。
5、新鲜复苏的菌种活性不稳定,常规需连续继代培养2代,待活性稳定后,方可用于各类实验操作。
6、冻干管开启操作需由专业微生物实验人员完成,三级生物危害菌种必须在生物安全柜内操作,普通标准菌种可在超净台操作;全程做好个人防护,重点防护面部,防止玻璃碎片溅入眼部。
7、所有开管、复苏操作均需在无菌安全设备内进行,实验结束后,全部实验器皿需经灭菌处理后再统一销毁。
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