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次
qPCR实验中安全科学地取材操作详解
2022-6-10
规划一个qPCR实验时,最先碰到的问题就是研究目的和材料的选择。要想做好一个qPCR实验首先要根据目的选好材料。以目标为导向的取材研究目标的设立是非常重要的一个起始环节,所以对于样本取材要
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次
如何处理实时荧光定量PCR的数据详解
2022-6-6
实时荧光定量PCR数据中的基本概念:在整个扩增过程中会出现基线期,指数期,线性期和平台期。其中在基线期和指数增长期,扩增产物都是以指数级增长,但是在基线期我们没办法检测;而到了线性期和
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PCR原理、PCR扩增影响因素及预防详解
2022-5-10
PCR简介聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是利用一段DNA为模板,在DNA聚合酶和核苷酸底物共同参与下,将该段DNA扩增至足够数量,以便进行结构和功能分析的一种反应。PCR扩增原理核
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次
qPCR扩增过程中影响Ct值的因素及解决办法详解
2022-4-27
导读Ct值是荧光定量PCR重要的结果呈现形式,它被用于计算基因表达量差异或者基因拷贝数。那么荧光定量的Ct值多大被认为是合理?如何保证Ct值的有效范围呢? Ct值以及Ct值的作用:Ct值概念:也称
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次
实验过程中核酸降解的预防手段与方法
2022-4-14
导语在实验过程中,最心累的莫过于好不容易提取的核酸却降解了。那么核酸为什么会发生降解呢,我们又该如何预防呢?关于核酸降解,你了解多少呢?让我们一起对核酸降解一探究竟吧。 什么是核酸
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移取PCR Master Mix对qPCR结果的准确性的影响
2022-3-30
Overview定量聚合酶链反应(qPCR)分析具有高灵敏度,这是其成功并广泛应用于科学实验室的最重要原因之一。然而,包括移液技术在内的许多因素都会对qPCR分析的结果产生影响。在进行基于PCR原理的
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如何改进qPCR数据报告
2022-2-24
关于实时荧光定量PCR技术,最常见的应用是通过RT-qPCR进行基因表达分析、疾病诊断和管理(如病毒定量)、食品检测(如转基因或过敏原分析)以及动物或植物育种等研究。这种方法非常灵敏,因此为
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次
影响qPCR最终效果的六个要素分析与解决方法
2021-12-14
实时荧光定量PCR:在PCR反应体系中加入荧光基团(探针或染料),利用荧光信号积累实时监测整个PCR反应过程,最后通过Cq或Ct值和标准曲线对起始模板进行绝对定量或相对定量分析。而评估荧光定量P
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次
qPCR扩增曲线的问题综述与解决方法总结
2021-12-1
大家好!首先跟大家做一个自我介绍:我是扩增曲线,来自荧光定量PCR,是用于描述qPCR动态进程的曲线,我有两种形态,一种是线性图谱:横坐标是循环数,纵坐标是荧光强度值;另一种是对数图谱:横
2003
次
Azure Cielo™实时荧光定量PCR系统在检测低拷贝端粒基因的应用
2021-11-24
我们都知道在实时定量PCR(qPCR)中,可以通过Cq值和标准曲线得出样本的初始拷贝数。但Cq值与样品中靶标的拷贝数有关,也会受到PCR反应的效率和仪器检测灵敏度的影响。高灵敏度的仪器可以减少检
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次
一文揽尽:荧光定量PCR扩增曲线哪个阶段最重要
2021-11-17
qPCR扩增曲线一般分成四个阶段:基线期、指数期、线性期和平台期。那么每个阶段PCR产物量的变化都有什么区别呢?哪个阶段最重要呢?小编这就一一道来。基线期PCR起始时,刚开始前几个循环的荧光
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针对新手专用PCR原理讲解与分析
2021-11-9
什么是实时荧光定量PCR(qPCR)?在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过Cq值和标准曲线对起始模板进行定量分析的方法。一.使DNA产物发出荧光的常用标记方
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Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统在快速可靠地检测新冠病毒的应用
2021-11-3
在应对病毒性大流行疾病时,为了有效控制病毒传播和减少感染人群,快速且可靠的诊断是至关重要的。那么目前检测COVID-19的 "黄金标准 "依赖于一种成熟的技术,即反转录定量聚合酶链反
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新手须知的qPCR操作技巧详解(下篇)
2021-8-26
上一篇文章跟大家介绍了qPCR实验中引物设计及加样的相关操作技巧,今天我们再跟大家分享其他的实用技巧,这些入门级知识一定要掌握牢固哦。1、阴性对照的技巧:阴性对照一般是指用水代替模板的反
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次
MeRIP-qPCR方法原理、结果含义、展示方法及应用细谈
2021-8-10
m6A等RNA修饰的主要研究手段是通过MeRIP方法对发生修饰的片段进行富集,其后进行高通量测序分析修饰位点。而无论是一篇仅展示修饰位点分布特点的谱学文章,还是深入研究修饰调控基因表达机制的文
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PCR Efficiency在线分析工具在预测PCR扩增效率的使用
2021-7-30
目前已开发多种工具可以进行PCR引物的设计,但大多数工具只考虑避免发夹结构形成、3'末端核苷酸的选择、引物解链温度等问题,并没有考虑内在扩增子的特征以及没有预测给定扩增子和引物对的P
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新手须知的qPCR操作技巧(上篇)
2021-7-30
实时荧光定量 PCR(qPCR)自问世以来,就受到了广大生命科学实验工作者和医院检验工作者的极大关注,使得该技术得到了很快的普及。虽然qPCR技术目前应用方向十分广泛,但是仍碰到很多用户在实验
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荧光定量PCR实验流程中常见的阴性对照与阳性对照介绍
2021-7-15
什么鬼?实验结果又不理想,Ct值怎么又这么大呢?是哪一步出现了问题呢?哎哎哎,怎么没有扩增曲线呢?在您看到荧光定量 PCR 实验结果时,是不是也发出过这样的疑问呢?总感觉哪个实验步骤出现了
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qPCR性能分析的四大要素-效率、线性动态范围、检测限和精密度
2021-6-28
MIQE指南中明确提出,进行qPCR实验时必须测定以下检测性能特点:PCR的效率、线性动态范围、LOD和精密度。1、PCR的效率:强大和精确的qPCR测定通常具有高效率。在报告目的基因相对于参照基因的mR
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实时荧光定量PCR引物设计原则中扩增子大小对qPCR产量影响的应用
2021-6-11
一般情况下,实时荧光定量PCR引物设计原则中会提到扩增子大小对实时荧光定量PCR的扩增效率有一定作用。所以通常建议使用相对较短的扩增子长度,范围为50到150个碱基对(bp)。由于小片段不太容易
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