ArrayJet-RPPA 芯片揭示 Pdcd4-Rictor 经 PFKFB3 调控肿瘤糖代谢

【Research Square】Pdcd4–Rictor Interaction Suppresses PFKFB3 to Inhibit Tumorigenesis
Pdcd4 与 Rictor 的相互作用，抑制 PFKFB3蛋白表达，进而阻止肿瘤发生

mTOR 可组装为 mTORC1、mTORC2 两类复合物。Rictor 是 mTORC2 的核心支架蛋白，维持复合物结构完整性与激酶活性，通过磷酸化 Akt、SGK1 等底物调控细胞增殖、存活、迁移。该蛋白在肺癌等多种肿瘤中扩增过表达，与不良预后相关。

mTORC2 还可调控糖酵解关键酶 PFKFB3，后者在非小细胞肺癌（NSCLC）中上调，促进糖酵解和肿瘤生长。已有研究表明抑癌蛋白 Pdcd4 结合 Rictor 并抑制 mTORC2 活性，但两者结合的关键位点以及互作调控 mTORC2、介导肿瘤发生的下游机制尚不明确。

作者单位：美国肯塔基大学医学院

文献平台：Research Square（预印本）

发布时间：2026年4月22日

研究样本：HCT116 细胞；shLacZ 对照组与 shPdcd4 敲低组

芯片类型及点样仪：ArrayJet微阵列生物芯片点样仪

研究者分别收集对照组和 Pdcd4 敲低组 HCT116 细胞裂解液，通过 ArrayJet微阵列生物芯片点样仪点样至硝酸纤维素膜上，制备 RPPA 反相蛋白微阵列芯片。随后，RPPA 芯片与不同蛋白的特异性抗体孵育，采用法国 Innopsys公司的近红外生物芯片扫描分析仪进行荧光信号的检测与分析，对比两组细胞中糖酵解和三羧酸循环（TCA cycle）相关蛋白的信号差异。

结果如图1所示，与对照组相比，Pdcd4 敲低后，HK2 和 PFKFB3 等糖酵解相关蛋白信号升高，其中 PFKFB3 升高最为明显；而 ACO1、MDH1、MDH2 和 OGDH 等 TCA 循环相关蛋白信号降低。

图1：Pdcd4 敲低后代谢相关蛋白的 RPPA 筛选结果。热图比较 shLacZ 对照组与 shPdcd4 组，红色表示相对信号升高、绿色表示相对信号降低；红色箭头标示 PFKFB3。PFKFB3 在 Pdcd4 敲低后明显升高。

本文揭示了 Pdcd4 一条全新、不依赖蛋白翻译的抑癌通路，拓展了对 Pdcd4 抑癌功能的认知。研究阐明了Pdcd4-Rictor-mTORC2-PFKFB3 信号轴共同调控肿瘤细胞代谢的机制，并解释了 Rictor 在 NSCLC 中促癌的部分分子机制：Rictor 高表达可稳定 PFKFB3 蛋白，促进糖酵解与肿瘤增殖。上述发现为肺癌代谢靶向治疗提供了新思路。

原文链接：https://doi.org/10.21203/rs.3.rs-9172690/v1

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