PolyAn PMMA荧光微球在纳米流式荧光分辨率评估中的应用

细胞外囊泡（EV）是各类细胞分泌的纳米级脂质囊泡，介导细胞间通讯，与肿瘤、炎症等多种疾病密切相关。但 EV 粒径小、折光率低、样本成分复杂，检测难度较大。传统流式细胞仪由于散射与荧光检测灵敏度不足，难以识别 200nm 以下的小型囊泡；纳米流式细胞仪虽灵敏度显著提升，但检测前仍需标准品验证和评估仪器对不同粒径、不同荧光强度颗粒的分辨能力。

作者单位：丹麦奥胡斯大学、南丹麦大学等
文献平台：bioRxiv（预印本）
发表年份：2025年
研究对象：CytoFLEX Nano纳米流式细胞仪；不同材料校准微球、荧光脂质体及细胞外囊泡样品
基材：PolyAn PMMA ，荧光微球（约120、230和500 nm）  
检测 EV 前，纳米流式细胞仪使用多种校准标准品包含PolyAn PMMA 荧光微球，检测纳米小颗粒的荧光分辨率。PolyAn的微球有 120nm、230nm、500nm 等多种粒径规格，并分为多个荧光强度类别。实验将多种荧光强度的微球混合后进样检测，观测各组荧光峰的分离效果，以仪器在绿色、黄色、红色荧光通道的分辨能力。

如图1所示，单独检测 120 nm 的 PolyAn PMMA 荧光微球时，仪器在绿色、黄色、红色通道上，均能区分不同荧光强度。但混合检测这4种不同荧光强度的微球时，各个荧光峰发生重叠，无法完全分开。

当微球粒径增至 230 nm，红色通道下4种荧光强度的峰可以有效区分，绿色与黄色通道存在明显重叠；500nm 微球的绿色、红色通道分辨效果进一步提升。因此，微球粒径大小和检测通道，会影响仪器对不同荧光强度的分辨能力。
利用纳米流式细胞仪检测细胞外囊泡这类微小颗粒时，需考虑微球的粒径、荧光通道带来的分辨差异。因此，需用微球标准品对纳米流式仪器进行分辨性能校验，确保细胞外囊泡检测结果的准确性和可靠性。

原文链接：https://doi.org/10.64898/2025.12.15.694348

德国PolyAn是一家纳米科技公司，专注于采用表面分子工程（Molecular Surface Engineering，MSE）进行表面修饰，包括修饰载玻片与修饰微孔板。

如：环氧基载玻片、氨基载玻片、醛基载玻片、马来酰亚胺基载玻片、N-羟基琥珀酰亚胺基载玻片、羧基载玻片、苯基二异硫氰酸酯基载玻片、叠氮基载玻片、巯基载玻片、链霉亲和素修饰载玻片、中性亲和素修饰载玻片，用于生物样品分子固定以及ELISA实验。

PolyAn也提供单分散PMMA（polymethyl methacrylate）荧光微球（微珠），可用于多重微球分析、流式细胞仪校准和荧光成像系统校准。
环亚生物科技（APG BIO）作为德国PolyAn公司中国区代理，为客户提供各种表面修饰的载玻片、盖玻片、微孔板以及荧光微球。