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THUNDER™ MEK1 TR-FRET试剂盒在MEK1磷酸化高通量检测中的优势

浏览次数:262 发布日期:2026-7-17  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负

RAS-RAF-MEK-ERK 作为 MAPK 家族中与肿瘤发生发展关联最紧密的信号轴,其异常活化贯穿于黑色素瘤、非小细胞肺癌、结直肠癌等多种实体瘤的病程进展。MEK1 作为通路中承上启下的双重特异性激酶,S218/S222 位点的双磷酸化是其激活的核心分子标志,精准定量该位点磷酸化水平,既是解析通路调控机制的核心手段,也是 MEK 靶向药物研发中药效评价的核心指标。传统检测方法通量低、操作繁琐、批间稳定性不足,难以支撑规模化肿瘤靶向药筛选需求,构建高效的标准化检测体系已成为领域共性需求。

MEK1 磷酸化:MAPK 通路靶向研发的核心药效标尺
在 MAPK 级联反应中,MEK1 上游承接 RAF 家族激酶的激活信号,通过 S218/S222 位点磷酸化实现自身活化,进而特异性磷酸化下游 ERK1/2 分子,最终驱动肿瘤细胞增殖、抗凋亡与侵袭转移等恶性表型。该位点磷酸化水平可直接反映通路活化程度,其异常升高与肿瘤不良预后密切相关,是 MEK 抑制剂、RAF 抑制剂及上游通路调节剂药效评估的核心指标。当前肿瘤靶向药物研发规模持续扩大,化合物库初筛、构效关系分析、联合用药评价均需大量定量数据支撑,传统检测方法的效率短板日益凸显。

传统检测体系的技术局限:制约筛选效率的核心瓶颈
目前主流的磷酸化蛋白定量方法均存在难以规避的应用短板。蛋白质免疫印迹法虽可特异性识别靶蛋白,但实验流程涵盖蛋白提取、电泳、转膜、孵育、显影等多步操作,实验周期长、人力成本高,单批次处理样本量有限,且多步人工操作易引入批间偏差,定量重复性难以保障。

传统酶联免疫吸附实验虽可实现批量检测,但需固相包被与多次洗涤,操作流程繁琐,非特异性吸附易造成背景干扰,在 384 孔等高规格体系中检测稳定性下降,无法适配高通量筛选的严苛要求。

THUNDER™ MEK1 TR-FRET 试剂盒:均相技术重构检测效率
THUNDER™ Phospho-MEK1 (S218/S222) TR-FRET 细胞信号检测试剂盒基于夹心式时间分辨荧光共振能量转移技术,采用磷酸化位点特异性抗体配对分别标记荧光供体与受体,靶蛋白结合后形成夹心复合物触发能量转移,通过双波长荧光比值实现半定量检测。

该体系为完全均相免洗模式,样本裂解后可直接加样孵育,无需洗涤与分离步骤,操作流程大幅简化;同时兼容 96 孔与 384 孔双规格微孔板,支持单板式检测方案,可无缝对接自动化液体处理平台。

系统方法学验证显示,以 HeLa 细胞为模型,PMA 刺激诱导 MEK1 磷酸化的 EC₅₀达 2.17 μM,L779,450 抑制剂干预的 IC₅₀为 288 nM,定量精准度优异。体系 Z' 因子达 0.76,检测稳健性完全符合高通量筛选标准;细胞裂解液梯度滴定呈现良好线性关系,双板型体系下检测性能高度一致,通量适配性强。

该试剂盒可广泛适配 MAPK 通路调控机制研究、肿瘤细胞信号表型分析、MEK 靶向抑制剂高通量筛选等多元场景,以标准化的均相检测体系破解传统方法的通量瓶颈,为肿瘤靶向药研发提供高效可靠的技术支撑。

如需了解产品详细参数与订购信息,可访问优宁维商城产品页面:https://www.univ-bio.com/thunder-phospho-mek1/KIT-MEK1P-500.html

名称 货号 规格
THUNDER™ Phospho-MEK1 (S218/S222) TR-FRET Cell Signaling Assay Kit KIT-MEK1P-500 500points
THUNDER™ Phospho-LCK (Y394) TR-FRET Cell Signaling Assay Kit KIT-LCKP-500 500points
THUNDER™ Total JNK1/2/3 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit KIT-JNKT-500 500points
发布者:上海优宁维生物科技股份有限公司
联系电话:15921930842
E-mail:yh-wang@univ-bio.com

标签: MEK1 磷酸化
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