全能核酸酶在高盐病毒制备中高效去除宿主细胞核酸的优势

核酸酶能够有效去除各种形式的DNA和RNA，是去除宿主细胞核酸（HostCell DNA，HCD）的理想手段。但来自粘质沙雷氏菌的全能核酸酶（如Pannarase、Benzonase等产品）最适Na+/ K+盐浓度在0-20mM，有效范围在0-150mM。多应用于中低盐浓度的HCD去除。
 

如果在病毒制备中遇到高盐条件，怎么更好的去除宿主细胞核酸？

在高盐环境下，不仅可以抑制病毒载体聚集、提升产量。因此，在有的病毒制备工艺中，常采用高盐方法进行细胞裂解来代替冻融裂解，释放的病毒载滴度上会有提升。另外，高盐环境下，核酸酶去除HCD在工艺上比一步层析或一部超滤更具效率，核酸酶做到更好的特异性，产品回收率更高，且避免了层析和超滤装置的污染。
 

如果在下游纯化中遇到高盐条件，怎么更好的去除宿主细胞核酸？

在下游纯化环节，如果遇到高盐洗脱的层析样品中的HCD含量偏高，需要采取相应措施，通常是在层析后再利用核酸酶去除一次HCD。然而市面上的大多数全能核酸酶并不耐盐，高盐环境下就会失活，酶切效果大大降低。因此，选择耐高盐全能核酸酶是一个比较机智的方法。
 

逐典Pannarase耐高盐全能核酸酶

Pannarase耐高盐全能核酸酶是一种非特异性核酸内切酶，可以将任何形式的DNA和RNA(线性、环形、超螺旋)降解成3’-单核苷酸及二核苷酸，并可在宽泛的盐浓度和偏碱性pH操作条件下保持高效性。

所谓“工欲善其事，必先利其器”，逐典Pannarase耐高盐全能核酸酶符合GMP要求，专门为高盐状态下样品的HCD去除设计，降低工艺难度，提升生产效率。
 

逐典Pannarase耐高盐全能核酸酶优势

1，无动物源性,无氨苄青霉素、严格的内毒控制

2，先进的生产工艺，非传统His标签纯化、排除，引入金属离子风险位

3，严格的质控标准，确保单位酶活的、准确性以及批次间稳定性

4，更高的盐耐受性(0-500mMNaCI)、宽泛的pH范围(7.0-11.0)

Pannarase在150 mM Na+浓度条件下酶活性最高

 

图1.Pannarase耐高盐全能核酸酶耐盐曲线

 

图2.Pannarase耐高盐全能核酸酶酶切数据

实验数据：

 

非还原及还原的SDS-PAGE显示蛋白分子量约16kDa，未见杂蛋白

 

尺寸排阳色谱显示高纯度，无聚焦体产牛

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