经尿道灌注构建小鼠膀胱原位癌模型全攻略
做膀胱癌药效，MB49 打皮下是最省事的起步方式，易于测量。
但它有个绕不过去的硬伤——膀胱是空腔器官，临床最常见的给药方式是经尿道灌注，让药物直接接触尿路上皮。皮下模型里没有膀胱腔、没有尿液、没有那层完整的尿路上皮屏障，你没法评价药物在膀胱里停留多久、能不能透过 GAG 层、能不能作用到表浅肿瘤。
结果就是：体外有效、皮下有效，一进到膀胱灌注就失灵。尤其做 BCG 免疫治疗、非肌层浸润性膀胱癌（NMIBC）术后灌注、以及肿瘤复发机制研究时，皮下模型几乎给不出可用数据。
02它到底做什么
一句话：把膀胱癌细胞经尿道灌注到小鼠膀胱腔内，让细胞贴附在尿路上皮表面并长成肿瘤。
它和肺癌原位"开胸扎一针"完全不同——主流路线不开刀、不穿刺，靠一根导管从尿道进去。这也是膀胱原位模型最大的技术优势：创伤小、可重复、操作者之间差异相对可控，而且天然适配"灌注给药"这一临床场景。
03四条路线
① 经尿道膀胱灌注（主流路线）：麻醉后经尿道插入 24G／25G 留置针外套，排空膀胱，先做膀胱黏膜预处理，再把细胞悬液缓慢灌入，留驻 1 到 2 小时后撤管。创伤最小、可批量、最贴近临床灌注场景，是 NMIBC 和灌注药效研究的首选。
② 经腹膀胱壁内注射：下腹小切口暴露膀胱，把细胞直接打进膀胱壁肌层。适合做肌层浸润性膀胱癌（MIBC），但小鼠膀胱壁很薄，细胞容易漏到盆腹腔造成种植，手术技巧要求高。
③ BBN 化学诱导：长期饮水或灌胃给予 BBN（N-丁基-N-（4-羟丁基）亚硝胺），让肿瘤在尿路上皮原位自发长出来。最接近人类致癌过程，适合癌变机制和化学预防研究，但周期长、肿瘤多发且位置不均一。
④ 基因工程／原位自发模型：通过遗传改造驱动尿路上皮癌变。机制研究价值高，但构建周期和成本都更高。
对绝大多数做药效和灌注评价的团队，我们建议从"经尿道膀胱灌注"起步——它不开刀、成瘤率可做到 80% 以上，而且能直接复刻临床膀胱灌注给药。
04 成瘤率跨度
膀胱原位模型的成瘤率，文献报道跨度极大——从三成到接近百分之百。差别不在运气，而在这几个变量：小鼠品系的免疫缺陷程度、细胞状态与数量、膀胱预处理方式、细胞在膀胱里的留驻时间。
有研究做过系统比较：同样的细胞和操作，换成免疫缺陷更彻底的品系，成瘤率能从两三成跳到七成甚至全部成瘤；把留驻时间从 2 小时缩到 30 分钟，成瘤起始时间推后，但可治疗窗口反而拉长。
换句话说，这套模型的参数是可以"调"的——这也是为什么第一篇要花整篇讲准备，而不是直接上操作。
