基因敲除小鼠助力揭示内质网自噬维持脓毒症DC功能
脓毒症是感染引起宿主反应失调并致器官功能障碍的综合征。树突状细胞（dendritic cell, DC）是连接固有免疫与适应性免疫的抗原提呈细胞，其功能崩溃被视为脓毒症免疫抑制的重要特征之一。内质网稳态对免疫细胞功能十分重要，而内质网自噬（reticulophagy）这一清除受损内质网的选择性自噬方式是否参与脓毒症中DC功能的维持，此前并不清楚。
2026年3月24日，中国人民解放军总医院姚咏明团队与海军军医大学、得克萨斯大学西南医学中心等合作，在Advanced Science在线发表题为"RETREG1-Mediated Reticulophagy is Essential for Dendritic Cell Maturation and Function in Sepsis"的研究论文。该研究表明，内质网自噬受体RETREG1在脓毒症早期维持DC的成熟与功能，其上游由ATF6转录调控，下游经限制内质网应激与减少MHC-II泛素化两条途径起作用。
南模生物为该研究提供了Retreg1-KO小鼠。
研究团队以脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）刺激小鼠脾脏DC：24小时后CD80、CD86与主要组织相容性复合体II类分子（MHC-II）表达上调、IL-12分泌增加，并促进CD4+ T细胞增殖与辅助性T细胞1（Th1）极化；72小时后上述指标回落至基线，激发T细胞能力受抑。与之同步，RETREG1表达、LC3-II/LC3-I转化与内质网驻留蛋白SEC61B降解在24小时升高，RETREG1与自噬体、溶酶体共定位增强，透射电镜可见内质网相关自噬体增多；72小时则相反。另一受体TRIM13虽时相相似，但Trim13缺失并未损害DC对LPS的响应，提示该表型对RETREG1相对特异。离体实验中，Retreg1-KO的脾脏DC与骨髓来源DC经LPS刺激后成熟标志与IL-12表达下降、激发T细胞能力减弱，凋亡比例则与野生型相当。
体内脓毒症模型中RETREG1影响器官损伤与结局在盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture, CLP）所致多菌脓毒症模型中，脾脏DC同样24小时活化、72小时受抑，内质网自噬与之同步。DC特异性Retreg1条件性敲除小鼠在CLP后DC活化受抑、多器官损伤加重、生存率下降，外周血T淋巴细胞与CD4+ T细胞比例降低、Foxp3+调节性T细胞扩增，循环IL-4、IL-10、TGF-β升高而IL-2、IFN-γ降低。不过，CLP引起的cDC1减少与cDC2扩增在两种基因型间相当，提示Retreg1缺失并未改变DC亚群构成。
两条相互独立的下游机制一方面，Retreg1缺失加剧LPS诱导的内质网肿胀与HSPA5、ATF4、DDIT3、EIF2AK3-EIF2A磷酸化等应激指标升高，并伴活性氧增多；用Salubrinal抑制该通路可部分恢复DC表面分子表达，并在体内减轻多器官损伤、改善生存、部分逆转免疫抑制。另一方面，质谱与富集分析提示抗原加工提呈、MHC-II复合物与泛素化过程受Retreg1缺失影响最明显。蛋白酶体抑制剂MG132可恢复Retreg1-KO DC的MHC-II表达；免疫沉淀显示LPS在野生型DC中降低MHC-II泛素化，Retreg1-KO DC中则未见降低。进一步发现MARCH8（而非MARCH1）在Retreg1-KO DC中上调，RETREG1可与MARCH8结合并共定位；Retreg1缺失增强MARCH8与MHC-II的结合、延长MARCH8半衰期，其降解更依赖自噬途径。Salubrinal并不影响MARCH8表达，提示上述两条机制彼此独立。
ATF6为上游转录因子，患者样本提示相关性未折叠蛋白反应的三条通路中，抑制ATF6可降低LPS刺激DC中RETREG1的mRNA与蛋白，抑制EIF2AK3-ATF4或ERN1-XBP1则无此作用；Atf6缺失的DC进一步印证。双荧光素酶报告实验提示ATF6可直接结合RETREG1启动子，生物信息学识别出三个潜在结合位点，删除后转录激活消失；CUT-Tag显示ATF6结合峰主要位于启动子区，靶基因富集于自噬等通路。在纳入的6例脓毒症患者（3例生存、3例死亡）中，死亡者序贯器官衰竭评估（SOFA）评分更高、免疫抑制更明显，循环DC的CD80、CD86与MHC-II更低，RETREG1 mRNA与内质网自噬共定位减少。公共单细胞数据亦显示，脓毒症患者循环DC中DC3亚群富集，其内质网自噬与活化相关基因同时下调。
综上所述，此研究提示RETREG1介导的内质网自噬是脓毒症早期维持DC成熟与功能的重要环节：ATF6驱动RETREG1表达，RETREG1经EIF2AK3-ATF4-DDIT3通路限制内质网应激，并通过降解MARCH8减少MHC-II泛素化以维持抗原提呈；该环节缺失则加重免疫抑制与器官损伤。靶向内质网自噬或可为改善脓毒症免疫麻痹提供新的可选思路。
