不同质量的内切酶,实验结果大不相同!
浏览次数:4326 发布日期:2009-4-21
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不好的内切酶常常被各种蛋白酶、非特异外切酶和核酸外切酶污染。使用被外切酶污染的内切酶切割DNA,则会在切割底物的同时破坏产物的末端(外切酶偷偷切掉1、2个bp,琼脂糖电泳却看不出来),让后续的连接、克隆和表达出现问题! 而NEB提供的内切酶大部分都经过重组改造,在最大程度上避免了外切酶污染的问题,让你的基因安全可靠!
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好的内切酶 |
不好的内切酶 |
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· 活性高 · 品质稳定,保存期长 · 无其它核酸酶污染(包括外切酶污染) |
·活性不高 ·保存一段时间后活性迅速下降 ·有其它核酸酶的污染(包括外切酶污染) |
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质粒DNA |
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酶切反应 |
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好的内切酶切割 |
不好的内切酶切割 |
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完整的DNA片段
连接 |
完整的DNA片段
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少量的外切酶损坏DNA末端 不完整的DNA片段+1、2个dNTP |
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成功连接,克隆并表达 |
连接失败,克隆不成功,无法表达或产物不正确 |
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NEB EcoRV: Survival rate=49/50 |
Company T EcoRV: Survival rate=3/50 |
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看看,不同质量的内切酶,实验结果大不相同!
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