4种蛋白定量技术的原理、特点、应用及选择指南
“低丰度蛋白测不到、样本量少不够用、想多因子同步检测、特殊样本难处理……生物科研中，蛋白定量的场景需求千差万别，选对方案比选贵方案更重要。本文聚焦4大主流技术，从原理、特点、应用场景三维度梳理，帮您匹配专属蛋白定量方案！”
首先为您总结热门研究领域常见蛋白检测指标：
蛋白检测技术如今已是百花齐放，为了便于区分，我们从灵敏度、检测指标数量、检测成本三个核心维度，对常见技术做了归类梳理。可以发现：不同技术的优势各有侧重，并没有哪一种能满足所有需求。所以在实际选择时，不用纠结“全能”，瞄准自己实验最核心的需求即可。
常见蛋白检测技术中，Simoa和MSD的灵敏度最高，可达fg/ml级别，Simoa基于“单分子捕获”，因此更适用于单个超低丰度蛋白的检测，MSD基于电化学发光原理，因此在灵敏度高的同时可以检测10个因子；hsELISA和HICA属于升级版的ELISA，是灵敏度略高的单因子检测技术；somalogic和Olink主打检测指标多，单次可测1000+指标，多用于组学检测；Luminex和CBA灵敏度通常在pg/ml级别，检测指标单次可达50+因子，且单价低，广泛适用于基础多因子筛选。基于实用性的考虑，我们选择了4种代表性技术进行介绍。
首先来看下ELISA、Luminex、MSD、CBA技术的参数对比。
4种蛋白定量技术参数对比
01 ELISA
常规ELISA
原理
通过酶促反应放大信号，以吸光度实现定量。
特点
- 应用广泛：经典技术，多种实验中经过验证；
- 价格实惠：单价低，配合酶标仪使用，使用门槛低；
- 性能适中：灵敏度和检测范围满足常规单子检测需求。
适配
- 单指标检测；
- 需要充足样本量；
- 适配中等丰度蛋白检测。
优质好物分享
| 货号 | 种属 | 靶点 | 产品名称 |
| abs510006 | Human | TNF-α | Human TNF-α ELISA Kit |
| abs510003 | IL-6 | Human IL-6 ELISA Kit | |
| abs510007 | IFN-γ | Human IFN-γ ELISA Kit | |
| abs510002 | IL-1β | Human IL-1β ELISA Kit | |
| abs510004 | IL-8/CXCL8 | Human IL-8/CXCL8 ELISA Kit | |
| abs530010 | Mouse | TNF-α | Mouse TNF-α ELISA Kit |
| abs520004 | IL-6 | Mouse lL-6 ELISA Kit | |
| abs520001 | IL-1β | Mouse IL-1β ELISA Kit | |
| abs520007 | IFN-γ | Mouse IFN-γ ELISA Kit | |
| abs520005 | IL-10 | Mouse IL-10 ELISA Kit | |
| abs530003 | Rat | IL-6 | Rat IL-6 ELISA Kit |
| abs530007 | TNF-α | Rat TNF-α ELISA Kit | |
| abs530002 | IL-1β/IL-1F2 | Rat IL-1β/IL-1F2 ELISA Kit | |
| abs553302 | IL-1β | Rat IL-1β ELISA Kit | |
| abs553801 | IL-1β | Rat IL-1β High Sensitivity ELISA Kit | |
| abs510030 | Monkey&others | Insulin | Human/Porcine Insulin ELISA Kit |
| abs540001 | IFN-γ | Porcine IFN-γ ELISA Kit | |
| abs554321 | CCL17 | Monkey CCL17 ELISA Kit | |
| abs554282 | CRP | Monkey CRP ELISA Kit | |
| abs554363 | IFN-γ | Monkey IFN-γ ELISA Kit |
One-step ELISA
原理
将传统Elisa中的“一抗孵育”和“二抗孵育”两个步骤合并为一步完成，仅需一次孵育就能完成抗原-抗体的结合。
特点
- 极速省时：1块板仅需1h，5块板仅需1.5h；
- 节省样本：每孔仅需50μl；
- 高灵敏度：灵敏度低至0.13pg/ml；
- 操作极简：仅需1次孵育+1次洗板。
适配
- 单指标检测；
- 追求实验效率。
优质好物分享
| 货号 | 种属 | 靶点 | 产品名称 |
| S0C3005-1x96T | Human | IFN-γ | Human IFN-γ OneStep ELISA Kit |
| S0C3018-1x96T | Human | IFN-α | Human IFN-α OneStep ELISA Kit |
| S0C3024-1x96T | Human | TNF-α | Human TNF-α OneStep ELISA Kit |
| S0C3004-1x96T | Human | IL-6 | Human IL-6 OneStep ELISA Kit |
| S0C3001-1x96T | Human | IL-2 | Human IL-2 OneStep ELISA Kit |
| S0C3013-1x96T | Human | IL-1β | Human IL-1β OneStep ELISA Kit |
| S0C3003-1x96T | Human | IL-13 | Human IL-13 OneStep ELISA Kit |
| S0C3009-1x96T | Human | IL-5 | Human IL-5 OneStep ELISA Kit |
| S0C3036-1x96T | Human | IL-8 | Human IL-8 OneStep ELISA Kit |
| S0C3007-1x96T | Human | lgG (Total) | Human IgG (Total) OneStep ELISA Kit |
| S0C3019-1x96T | Mouse | IL-6 | Mouse IL-6 OneStep ELISA Kit |
| S0C3030-1x96T | Mouse | IL-10 | Mouse IL-10 OneStep ELISA Kit |
| S0C3020-1x96T | Mouse | IL-2 | Mouse IL-2 OneStep ELISA Kit |
| S0C3029-1x96T | Mouse | IL-1β | Mouse IL-1β OneStep ELISA Kit |
| S0C3023-1x96T | Mouse | TNF-α | Mouse TNF-α OneStep ELISA Kit |
| S0C3035-1x96T | Mouse | IFN-γ | Mouse IFN-γ OneStep ELISA Kit |
| S0C3008-1x96T | Mouse | lgG (Total) | Mouse IgG (Total) OneStep ELISA Kit |
酶标仪
优势
- 可检测功能：吸光度、化学发光、荧光强度；
- 高灵敏度滤光片保证荧光强度，32位滤光片转轮，任意组合；
- 传承高灵敏度特点、检测性能更佳。
| 设备型号 | 货号 | 检测功能 | Abs光路 |
| Victor Nivo 3F | HH35000300-3F | Abs、Fl、Lum | 滤光片 |
| Victor Nivo 3S | HH35000310-3S | Abs、Fl、Lum | 光谱仪 |
| Victor Nivo 5F | HH35000300-5F | Abs、FI、Lum、FP、TRF&TR-FRET | 滤光片 |
| Victor Nivo 5S | HH35000310-5S | Abs、FI、Lum、FP、TRF&TR-FRET | 光谱仪 |
02 Luminex
原理
磁珠包被特异性抗体，通过悬浮液相芯片技术检测多因子。
特点
- 高通量：可检测1-115个因子；
- 高灵活度：可自定义微球编码和抗体偶联，适应不同需求；
- 操作流程精细：需提前稀释和处理，确保样本适合检测。
适配
- 生物标志物筛选；
- 批量样本多因子检测。
优质好物分享
| 货号 | 名称 | 种属 | 指标 |
| LXLBH48-1 | 人细胞因子-48因子Panel | Human | β-NGF, CTACK/CCL27, Eotaxin/CCL11, FGF-basic, G-CSF, GM-CSF, GRO-α (Gro-a/KC/CXCL1), HGF, IFN-α2, IFN-γ, IL-1α, IL-1Ra, IL-2Ra, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8/CXCL8, IL-9, IL-10… |
| LXLBM23-1 | 小鼠细胞因子-23因子Panel | Mouse | Eotaxin/CCL11, G-CSF, GM-CSF, IFN-γ, IL-10, IL-12(p40), IL-12(p70), IL-13, IL-17A, IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, GRO-α (Gro-a/KC/CXCL1), MCP-1/CCL2, MIP-1α/CCL3, MIP-1β, RANTES, TNF-α… |
| LXLBM31-1 | 小鼠趋化因子-31因子Panel | Mouse | BCA-1/CXCL13, CTACK/CCL27, ENA-78/CXCL5, Eotaxin/CCL11, Eotaxin-2/CCL24, Fractalkine/CX3CL1, GM-CSF, I-309/CCL1, IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-16, IP-10/CXCL10, I-TAC/CXCL11, KC/CXCL1… |
| LXLBH96-1 | 人生物标志物-96因子Panel | Human | 6Ckine, APRIL, BAFF, BCA-1, CCL28, sCD137, sCD40L, CTACK, CXCL16, EGF, ENA-78, Eotaxin, Eotaxin-2, Eotaxin-3, sFas, sFasL, FGF-2, FLT-3L, Fractalkine, GCP-2, G-CSF, GM-CSF, Granzyme A, Granzyme B, GROα… |
| LXLBH10-1 | 人炎症 10因子Panel | Human | IL-1β/IL-1F2, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8/CXCL8, IL-10, IL-12 p70, IL-13, TNF-α, IFN-γ |
| LXLBM10-1 | 小鼠炎症 10因子Panel | Mouse | IL-1β/IL-1F2, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, CXCL1/GRO/α/KC/CINC-1, IFN-γ, TNF-α |
03 MSD
原理
石墨烯电极板通电后，标记物发生氧化还原反应循环释放光子，信号转化为电信号定量。
特点
- 多因子检测：同时检测1-10个指标；
- 超高灵敏度：低至0.54fg/mL；
- 宽动力学范围：5-6个logs；
- 样本需求量少：仅需10-25μL样本量；
- 抗基质干扰强：无需复杂前处理即可检测多种类样本；
- 开放性平台：兼容多糖、类病毒等多种类生物分子。
适配
- 待测蛋白丰度低；
- 检测蛋白丰度跨度大；
- 特殊珍贵样本；
- 需要单/多因子精准定量样本。
优质好物分享
| 类型 | 货号 | 产品名称 | 检測靶点 | 应用领域 |
| S-Plex | K15639S | S-PLEX Neurology Panel 1 Kit | GFAP, Neurofilament L,Tau (total)|Human, Mouse, Rat，Non-human primate | 神经疾病相关研究 |
| S-Plex | K15396S | S-PLEX Proinflammatory Panel 1(human) Kit | IFN-γ,IL-1β,IL-2,1L-4,1L-6,IL-10,IL-12p70,IL-17A,TNF-α | 促炎因子相关研究 |
| S-Plex | K151AKV | S-PLEX Custom Human Biomarkers Kit | IFN-γ,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-12p70,IL-17A,TNF-α|Human | 免疫学生物标志物 |
| V-Plex | K15736U | V-PLEX Respiratory Panel7(lgA) Kit | Flu A/Ghana/39/2021 H5,Flu A/Massachusetts/18/2022 H3... | 呼吸道传染病研究 |
| V-Plex | K15054D | V-PLEX Human Cytokine 29-Plex Kit | Eotaxin,Eotaxin-3,GM-CSF, IFN-γ,IL-1α,IL-1β,IL-2,IL-4 ... | 细胞因子与免疫相关分子 |
| U-Plex | K15750K | U-PLEX T-cell Differenti-ation Panel 1(human) | IL-1α,IL-4,IL-5,IL-12/IL-23p40,IL-13,IL-15，IL-17A/F,IL-21,IL-22,VEGF-A|Human.. | T细胞相关研究 |
| U-Plex | K15068M | U-PLEX Biomarker Group 1(NHP)Assays | CTACK,ENA-78,Eotaxin,Eotaxin-2,Eotaxin-3,FLT3L,Fractalkine... | 疾病生物标志物 |
| U-Plex | K151AEM | U-PLEX Custom Immuno-0ncology Group1(human)Assays | 4-1BBL/TNFSF9,APRIL/TNFSF13,BAFF-R/TNFRSF13C.. | 肿瘤免疫学 |
| U-Plex | K15297K | U-PLEX Metabolic Combo 1(mouse) | BAFF, BDNF, C-Peptide,FGF-21,Ghrelin (active) ... | 代谢相关研究 |
MSD不同机型对比
04 CBA
原理
基于流式液相技术，通过微球标记抗体实现多因子同步检测。
特点
- 多因子检测：单孔最多测12个因子；
- 捕获效率高：捕获微球和样品呈悬浮态充分混合，接触均匀，易于捕获；
- 流式仪检测：常规流式检测流程，无需额外学习复杂操作。
适配
- 同时检测少量因子；
- 已有流式细胞仪，熟悉流式操作。
优质好物分享
| 货号 | 立品名称 | 种属 | 指标 |
| LXCBH07-1 | CBA人炎症7因子Panel | Human | IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-17A,IFN-γ,TNF-α |
| LXRCBH06-1 | CBA人炎症6因子Panel 1 | Human | IL-10,IL-6,IL-1β,IL-8,TNF,IL-12p70 |
| LXCBM07-1 | CBA小鼠炎症7因子Panel | Mouse | IFN-γ,IL-10,IL-2,IL-4,IL-6,IL-17A,TNF |
| LXCBM06-1 | CBA小鼠炎症6因子Panel | Mouse | IFN-γ,IL-10,IL-6,TNF,IL-12p70,MCP-1 |
4种蛋白定量方案并无绝对优劣之分，关键在于是否适配实验场景——无论是侧重少量因子检测的精准性，还是追求高通量分析的效率，亦或是受限于现有仪器设备，都能找到匹配的技术方案。
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