微环DNA的产生、特点及应用
传统的质粒负重必要的基因表达框（启动子+目的基因+终止子）之外，还驮着细菌复制起点（Ori）、抗生素抗性标记、多克隆位点……这些东西在细菌扩增时有用，可一旦质粒进入哺乳动物细胞或人体内，就成了彻头彻尾的“行李”。这些多余的细菌DNA序列不仅毫无贡献，还会引发细胞的不必要免疫反应。
于是，一位“极简主义”的革命者登场了——微环DNA（minicircle）。
Minicircle是如何产生的？
微环DNA由全长微环亲本载体经PhiC31 整合酶催化生成；该酶可介导亲本微环上 PhiC31 attB 与 attP 位点发生位点特异性重组。该重组反应会产生两种产物：一是微环DNA（完全去除所有细菌骨架 DNA 序列）；二是亲本质粒副产物。 为去除残留亲本质粒，I-SceI 内切核酸酶可特异性识别并切割亲本质粒上的 I-SceI 酶切位点，最终使亲本质粒被降解清除。
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游离型质粒表达可持续数周
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无外源细菌骨架 DNA
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分子片段更小，转染效率更高
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目的基因插入无片段大小限制
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搭配专属优化型大肠杆菌微环制备菌株
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体外细胞实验、体内动物实验均可适
将1ug minicircle转染HEK293细胞可实现超过一周的强效基因表达
(A) 将2微克和4微克的minicircle（CMV-GFP-Luc）通过尾静脉注射到小鼠体内，在48小时后显示出优异的表达效果。(B) 与使用质粒DNA递送的转基因相比，minicircle递送的转基因能保持强劲的表达并持续数周，而质粒DNA递送的转基因表达会迅速丢失
代谢型荧光微环DNA应用Absin 代谢物荧光探针搭载了微环DNA载体技术,结合胞浆、线粒体、细胞核三大亚细胞结构的精准定位设计,以及检测探针+对照探针的配套体系。
① 转染效率更高:去除所有细菌骨架序列，分子量更小，适配多种细胞类型
② 表达更稳定持久:表达水平远超传统质粒，满足长时程活细胞成像需求;
③ 生物安全性更高:无抗生素抗性基因，可用于活体动物、原代细胞等敏感研究场景
④ 多种检测方法:兼容酶标仪、荧光显微镜、流式细胞仪等检测设备
酶标仪读值
荧光显微镜读值
热门货号|
货号 |
名称 |
规格/定位 |
用途 |
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pMC.CMV-MCS-EF1-GFP-SV40PolyA |
10 µg |
双独立启动子：CMV 驱目的基因，EF1α 单独驱 GFP；表达互不干扰 |
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pMC.CMV-MCS-EF1-RFP-SV40PolyA |
10 µg |
双独立启动子：CMV 驱目的基因，EF1α 单独驱 RFP；表达互不干扰 |
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pMC.EF1-MCS-IRES-GFP-SV40PolyA |
10 µg |
单 EF1α 启动子，IRES 串联 GFP，一条 mRNA 共表达 |
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pMC.EF1-MCS-IRES-RFP-SV40PolyA |
10 µg |
单 EF1α 启动子，IRES 串联 RFP，一条 mRNA 共表达 |
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MC-Easy Minicircle DNA Production Kit (Includes ZYCY10P3S2T producer E. coli strain) |
5 preps |
试剂盒自带 ZYCY10P3S2T 感受态，一步配齐 |
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Microcircle FiLa/Cytosol |
胞浆（Cytosol） |
监测细胞质内乳酸浓度变化，检测范围10 μM-2 mM |
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Microcircle FiLa/Nucleus |
细胞核（Nucleus） |
监测细胞核内乳酸浓度变化，检测范围10 μM-2 mM |
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Microcircle FiLa/Mitochondria |
线粒体（Mitochondria） |
监测线粒体内乳酸浓度变化，检测范围10 μM-2 mM |
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Microcircle FiLa-L/Cytosol |
胞浆（Cytosol） |
高灵敏度监测细胞质乳酸，检测范围0.2 μM-200 μM |
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Microcircle FiLa-L/Nucleus |
细胞核（Nucleus） |
高灵敏度监测细胞核乳酸，检测范围0.2 μM-200 μM |
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Microcircle FiLa-L/Mitochondria |
线粒体（Mitochondria） |
高灵敏度监测线粒体乳酸，检测范围0.2 μM-200 μM |
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Microcircle FiLa-C/Cytosol |
胞浆（Cytosol） |
FiLa/FiLa-L 的胞浆对照探针 |
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Microcircle FiLa-C/Nucleus |
细胞核（Nucleus） |
FiLa/FiLa-L 的细胞核对照探针 |
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Microcircle FiLa-C/Mitochondria |
线粒体（Mitochondria） |
FiLa/FiLa-L 的线粒体对照探针 |
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Microcircle SoNar/Cytosol |
胞浆（Cytosol） |
定量监测胞浆NAD+/NADH 氧化还原比率 |
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Microcircle SoNar/Nucleus |
细胞核（Nucleus） |
定量监测细胞核NAD+/NADH 比率 |
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Microcircle SoNar/Mitochondria |
线粒体（Mitochondria） |
定量监测线粒体NAD+/NADH 比率 |
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Microcircle iNapC/Cytosol |
胞浆（Cytosol） |
iNAP 系列 NADPH 探针的胞浆对照 |
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Microcircle iNapC/Nucleus |
细胞核（Nucleus） |
iNAP 系列的细胞核对照 |
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Microcircle iNapC/Mitochondria |
线粒体（Mitochondria） |
iNAP 系列的线粒体对照 |
