小鼠细胞特异性耗竭抗体在细胞耗竭实验中的应用及案例分享
Bio X Cell 提供一系列针对小鼠细胞表面蛋白的单克隆抗体，用于体内细胞特异性清除Depletion研究。体内细胞特异性清除Depletion实验被广泛用于确定特定细胞类型在各种免疫过程和疾病中的作用。
这些抗体可用于体内研究，其中注射的耗尽抗体旨在清除Depletion特定细胞类型。这些类型的实验可用于扩展和确认使用基因敲除小鼠品系获得的结果，或提供有关特定细胞类型的直接生物学相关性的信息。
这些抗体通过多种机制介导细胞清除Depletion，包括抗体依赖性细胞毒性 (ADCC)、补体依赖性细胞毒性 (CDC) 和抗体依赖性细胞吞噬作用 (ADCP)。
有关体内注射这些抗体的剂量和给药动力学的信息，Bio X Cell为每种清除Depletion抗体编制了一份最新的参考文献列表，以方便为您找到适合实验系统和目标的最佳方案。
Depletion打到动物体内有，有四个方式导致靶细胞的死亡
1、Complement-dependent cytotoxicity (CDC)
补体依赖的细胞毒性作用
2、antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC)
抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用
3、antibody-dependent phagocytosis (ADCP).
抗体依赖的细胞介导的细胞吞噬作用
4、complement-dependent cellular phagocytosis (CDCP)
补体依赖的细胞毒性作用
二 、文献实验案例
1、实验思路总结
| 文章主题 | Orchestrating intratumoral DC-T cell immunity for enhanced tumor control via radiotherapy-activated TLR7/8 prodrugs in mice |
| 目标 | 揭示肿瘤微环境（TME）中树突细胞（DC）与T细胞相互作用的动态调控机制 放疗激活的前药O-IMDQ能否在肿瘤局部特异性释放活性分子，激活DC并增强CD8⁺T细胞应答 优化放疗剂量方案（如4-6 Gy×3）能否协同增强原发灶控制并诱导远端效应 |
| 实验模型 | 体外&体内 |
2. 实验方法学关联表
| 方法学名称 | 具体操作 | 科学目的 | 与其他方法关联 |
| 前药合成 | N-氧化反应修饰IMDQ生成O-IMDQ | 实现辐射触发激活 | ↑ 分子对接验证结合位点改变↓ 体内外激活实验验证功能 |
| 分子对接 | 模拟TLR8-IMDQ/O-IMDQ复合物结构 | 阐明氧原子阻断机制 | → 指导前药设计↓ 细胞实验验证功能丧失/恢复 |
| 报告基因系统 | RAW-blue/hTLR8细胞检测TLR活性 | 定量前药激活效率 | ↑ 前药设计验证→ BMDC实验关联功能恢复 |
| BMDC实验 | 流式检测CD80/CD86/H2Kb-SIINFEKL | 评估DC成熟与抗原呈递 | ↑ RNA-seq揭示IFN通路激活→ 体内T细胞应答验证 |
| 多肿瘤模型 | MC38/B16F10/4T1双侧/转移模型 | 评估局部与全身疗效 | ↑ 细胞耗竭实验确定关键效应细胞→ 放疗剂量优化实验 |
| RNA-seq | 分选瘤内DC与CD8+T细胞测序 | 解析I型IFN通路机制 | ↓ IFNAR阻断实验验证功能→ 流式验证T细胞扩增与活化 |
3. 多肿瘤模型中，细胞耗竭实验确定关键效应细胞的抗体使用清单
| 抗体靶标 | 克隆号 | 货号 | 用途 |
| CSF1R | AFS98 | BE0213 | 巨噬细胞耗竭 |
| CD4 | GK1.5 | BE0003-1 | CD4+T细胞耗竭 |
| CD8 | 53-5.8 | BE0004-1 | CD8+T细胞耗竭 |
| NK1.1 | PK136 | BE0036 | NK细胞耗竭 |
| IFNγ | XMG1.2 | BE0055 | 中和IFNγ活性 |
靶标生物学意义
| 靶标 | 生物学意义 | 实验揭示的功能 |
| CSF1R | 巨噬细胞存活关键受体 | 耗竭后疗效不变 → 排除巨噬细胞核心作用 |
| CD4 | T辅助细胞标志 | 耗竭不影响疗效 → 非主要效应细胞 |
| CD8 | 细胞毒性T细胞标志 | 耗竭完全取消疗效 → 核心效应细胞 |
| NK1.1 | NK细胞标志 | 耗竭不影响疗效 → 非必要效应细胞 |
| IFNγ | Th1型免疫应答核心因子 | 中和后疗效丧失 → 必需细胞因子 |
