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PCR引物和测序引物不同方面归纳

浏览次数:708 发布日期:2024-10-17  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
一、定义不同:

PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增, 具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。PCR引物是一段非常短的寡核苷酸序列,它能和靶DNA也就是模板DNA 3'端和5'端特异性结合。在PCR时,在每一次热变性之后,引物会和模板DNA特异性的结合在一起,然后DNA聚合酶就会从引物结合位置的3'末端开始进行DNA链的延伸。一句话总结,引物有点像一个向导,为DNA聚合酶提供结合位点的指引标识。

测序引物分自带引物和通用引物,自带引物为客户自行设计的PCR扩增引物或者载体及目的片段上设计的引物进行测序。

二、作用不同:

通用引物一般在购买载体时公司提供,一般测序引物如T7、SP6、M13等测序公司免费使用。

不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方。PCR又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。

三、适用不同:

PCR引物又称为寡核苷酸引物,也就是RNA,是由人工合成的,分为两种,引物1和引物2。由于DNA聚合酶只能从核苷酸链的5'端到3'端进行复制,也就是只能识别3'的尾端。

测序必须为特异性引物,不能为随机、兼并、不纯、带荧光标记、长度过长引物.测序引物长度一般要求在18-25BP,最长不超过30BP..PCR引物要求相对低一些.简单说来就是PCR引物可以用来扩增但是不一定适合测序。


 
发布者:上海博湖生物科技有限公司销售部
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