细胞被支原体污染后的特征及鉴别方法

很多小伙伴都疑惑，细胞被支原体污染后的特征是什么？如何鉴别细胞被支原体污染了？今天，小爱带大家分享两个支原体污染的案例，共同探寻一下细胞被支原体污染后的特征。
 

图1 感染支原体的EBTr（牛胚气管细胞）

01 牛胚气管细胞

先来观察一下被支原体污染的牛胚气管细胞（图1），由成纤维样逐渐变得类上皮样；质膜铺展，溃烂；轮廓不清，边界模糊。再看右图，细胞处于边增殖边凋亡的状态，漂浮凋亡细胞过多。
 

图2 感染支原体的HT1080（人纤维肉瘤细胞）

02 人纤维肉瘤细胞

再观察一下被支原体污染的人纤维肉瘤细胞HT1080（图2），由上皮样逐渐变得类成纤维样，胞体细长，和前面的牛胚气管细胞形态变化刚好相反；伪足伸长，出现明显的拉丝现象，表明细胞可能在“痛苦”地迁移。使用了支原体杀除试剂（abs9375），彻底根除了支原体以后，如右图所示，细胞逐渐恢复了上皮样形态，拉丝减少。
 

图3 细胞膜上的支原体集落

03 支原体集落

给大家展示贴附在细胞膜上的支原体集落（图3），支原体是目前已知最小的原核生物，直径大小在0.1-0.3um，比细菌还要小。支原体可在培养液、细胞膜、细胞内增殖。单个支原体需要借助于电镜才可以观察到具体形态，图中膜上的黑点为支原体集落。细胞背景干净，形态没有大的变化，但质膜粗糙，布满黑点。

主要特征
细胞被支原体污染
1增殖减慢；
2上清液澄澈；
3背景干净；
4细胞形态异常（拉丝、铺展）；
5更换新的培养液细胞状态没有恢复。

细胞被支原体污染后的共性表现为细胞增殖减慢、上清液澄澈、背景干净，这3点可以明确地排除真、细菌污染。值得一提的是，当给细胞的营养体系不佳时，细胞也会表现出形态异常，所以，我们可以给细胞更换新的培养液，如果细胞也没有恢复正常形态，此时判断细胞极有可能被支原体“附身”了。
 

上述的判断方法需要丰富的经验积累，日常细胞培养中，我们还可以用PCR扩增试剂盒检测细胞是否有支原体污染。

图4 支原体检测试剂盒（PCR法）    
产品优势：
✔ 本试剂盒检测灵敏度高，可检测低至20个拷贝的支原体；
✔ 实验时间短，3小时即可完成；
✔ 已在多个支原体品种上做过验证。