流动下条件下活细胞实时成像设置详解

活细胞成像是在流动条件下细胞培养分析的一种可能的体现。

根据实验的持续时间和温度要求，有几种可能的设置具有不同的优点和缺点，本说明中显示和讨论了这些设置。

1. 无需培养箱即可设置

设备：

• 放置在显微镜旁边的 ibidi 泵系统

• 倒置显微镜

优点：

• 沿灌流管的均匀介质温度。

• 气泡产生的可能性低。

• 在较长时间内非常稳定。

• 成本极低且易于操作。

缺点：

• 细胞处于室温。

• 没有向细胞培养基供应 CO2（碳酸盐缓冲液不起作用）。

适合：

• 可以在室温下培养的细胞或生物。

• 没有细胞的实验。

• 如果细胞耐受温度下降，则可能用于短期成像。

2. 设置载物台顶部培养装置

设备：

• 放置在显微镜旁边的 ibidi 泵系统

• ibidi 载物台顶部培养系统（气体混合器和温度控制器）控制舞台顶部培养室的温度、二氧化碳和湿度。

• 倒置显微镜

优点：

• 细胞处于适宜的温度。

• 成本低。

缺点：

• 沿灌流管的温度梯度可能有产生气泡。

• 低 CO2 输入到培养基中。孵育室（提供 CO2）中的暴露时间非常短。

• 长期不稳定。

适合：

• 短期实验。

3. 设置载物台顶部培养装置和台式培养箱

设备：

• ibidi 泵系统

• 台式培养箱

• ibidi 载物台顶部培养系统（气体混合器和温度控制器）控制载物台顶部培养室的温度、二氧化碳和湿度。

• 倒置显微镜

优点：

• 细胞可以保持在 37°C，因为培养基的冷却只发生在从培养箱到载物台顶部培养的管道中。

• CO2 供应提供给储存器培养基和通道玻片。为获得最佳 CO2 供应，泵回端口连接到小型培养箱的气体。

• 中长期稳定。

缺点：

• 沿灌注管的温度梯度可能会在长时间内会产生气泡。

适合：

• 细胞需要控温的长时间培养。

• 更长的时间段，带有额外的气泡捕集器。

 

 

 

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