粪便隐血定性检测试剂盒(匹拉米洞法)使用说明书

粪便隐血定性检测试剂盒(匹拉米洞法)
 
一、产品简介：
粪便的化学检查有酸碱度反应、隐血试验、胆色素和脂肪测定等，其中隐血试验最具有重要的临床应用价值。上消化道出血量小于 5ml，粪便中无可见的血液，且红细胞破坏，显微镜检查也未见红细胞，而需要用化学法、免疫法、转铁蛋白法、血红蛋白荧光测定法等才能证实的出血，称为隐血，检查粪便隐血的试验称为粪便隐血试验(fecal occult blood test , FOBT)。化学法常用试剂有邻联甲苯胺、匹拉米洞、愈创木脂、无色孔雀绿、米土尔等。
雅吉生物粪便隐血定性检测试剂盒(匹拉米洞法)的检测原理是血红蛋白中的亚铁血红素具有类似过氧化物酶的活性，能催化 H₂O₂ 作为电子受体使色原底物匹拉米洞氧化而显紫色或紫蓝色，其颜色深浅与血红蛋白含量成正比，根据显色的快慢可以半定量血红蛋白即隐血含量，因此也可称作粪便隐血半定量试验。
本试剂盒多用于人或动物粪便血红蛋白检查， 应注意的是正常人或动物消化道也会微量出血或受到刺激后出血，或者模型动物饲料含有鱼粉、铁剂等，都可能导致试验结果出现假阳性。本法特点是灵敏度中、假阳性中，  可检出Hb 1~5mg/L。可联合使用高灵敏度、高特异性的邻联甲苯胺法。本试剂盒仅用于科研领域，不用于临床诊断或其他用途。

二、产品组成：

名称规格	100T	300T	存储
试剂(A): Pyramidon Solution	10ml	30ml	4℃ 避光
试剂(B): 氧化剂	10ml	30ml	4℃
使用说明书	一份

 
三、操作步骤(仅供参考)：
1、粪便标本应尽快收集并及时检测，避免长时间放置使反应的灵敏度降低，避免接触水。
2、用取样木片或牙签挑取少量粪便 10~50mg（绿豆大小），涂在消毒棉或白瓷板上。
3、滴加 Pyramidon Solution 2 滴(约 0.1ml)于粪便不同位置。
4、滴加 氧化剂 2 滴(约 0.1ml)，立即计时并观察颜色变化。
5、于 2min 内判读完毕。如 2min 内有蓝色出现，提示粪便含有血红蛋白(Hb)或粪便隐血试验阳性。
 
四、结果判断：
 

颜色变化	判读
加入试剂后立即呈现深紫色	(4+)
加入试剂后立即呈现紫色，并逐渐呈深紫色	(3+)
加入试剂后初显浅紫色，逐渐呈明显紫色	(2+)
10s 后由无色渐变为浅紫色或紫色	(+)
2min 内不显色	阴性

 
五、注意事项：
1、 在粪便标本采集、运送过程中和使用试剂进行检测时，操作人员应做好个人防护，避免人体接触，以防止可能产生的污染和自身感染。
2、 正常人或动物消化道也会微量出血或受到刺激后出血，导致本法有时会出现假阳性。
3、对无任何明显症状但怀疑可能有少量出现的情况，建议至少连续3天取样，并从不同样本部位取材做两次实验。
4、 应提前3天以上禁止食用动物血、肉、肝脏及富含叶绿素食物、铁剂、中药或其他特殊药物，以免出现假阳性反应。
5、对于结肠炎模型的实验动物，饲料成分不应含有鱼粉、铁剂或其他特殊药物，以免出现假阳性反应。
6、 Pyramidon Solution含有乙酸，刺激性比较大，应在通风橱里操作。本溶液颜色可随配置时间的长短而发生变化，但不影响其检测的灵敏度。
7、 氧化剂应注意密封4℃保存，6个月之后效率可能会下降。可用市售过氧化氢(30%)或过氧化脲配置1~3%的溶液。
8、 如有必要可用血液或血红蛋白溶液做梯度对照实验。
9、 本试剂盒不能与氧化剂共同存放，并避免阳光直射及高低温储存环境。 
 
六、有效期：12 个月有效。
 
七、存储：4℃运输，4℃保存。
 
附表 :
表 1粪便隐血试验化学法的干扰因素与评价

干扰因素	假阴性	假阳性
标本	粪便标本陈旧灵敏度降低，血液在肠道停留过久，血红蛋白 被细菌降解，血红素消失。	粪便隐血来源于非消化道出血如齿龈出血、鼻出血、月经血等。
食物和药物	含有大量维生素C 或其他具有还原作用的食品或药物	含血红蛋白的动物血，如鱼、肉、肝脏； 含过氧化物酶的叶绿素新鲜蔬菜；食用铁剂、铋剂；引起胃肠道出血的药物如阿司匹林、皮质固醇、非固醇类抗炎药、引起肠炎药物、秋水仙素、萝芙木碱、中药等
器材和试剂	过氧化氢浓度低或失效、试剂保存温度和湿度不当如冰冻、 受光、受热等失效	器材污染铜离子、铁离子、消毒剂、溴、铁、硼酸、过氧化酶等
操作	试验反应时间不足、显色判断 不准确	试验前在标本中加水降低了灵敏度，实际 上是增高了假阳性

 
表 2粪便隐血试验化学法的方法学评价
 

方法	特点	评价
邻联甲苯胺法	高灵敏度假阳性高	Hb 0.2~1.0mg/L，消化道有 1~5ml 出血即可检出。灵敏度过高方法，粪便有微量出血即呈阳性反应，故高灵敏度试验阴性时，即确认隐血为阴性。
匹拉米洞法	中灵敏度 中特异性	Hb 1~5mg/L，消化道有 5~10ml 出血时可检出。
愈创木脂法	低灵敏度高特异性	Hb 6~10mg/L，消化道有 20ml 出血时可检出。受食物、药物影响因素少，假阳性低，故如低灵敏度试验阳性时， 即可确定为隐血阳性。

附：不同浓度血红蛋白的显色效果对比：
（从左至右血红蛋白溶液浓度依次为 10ug/ml、50 ug/ml、200 ug/ml）
 
相关产品：
 

产品编号	产品名称
YS0032DC	Masson 三色染色液
YS0005DG	糖原 PAS 染色液
YS0006DH	苏木素伊红(HE)染色液
YS00635R	水合氯醛溶液(10%w/v)
YS00644R	实验动物标记染色液(红色)
YS00920R	血红蛋白溶液(1mg/ml)
YS10128R	枸橼酸钠抗凝剂(3.8%)
YS0511	粪便隐血定性检测试剂盒(邻联甲苯胺法)
YS0711	葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 微板法)
YS1167	尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)