PCR试剂盒技术特点与注意事项
PCR试剂盒按方法可以分为普通PCR试剂盒(定性)，荧光定量PCR试剂盒(定量)。荧光定量PCR试剂盒根据染料又分为SYBEGREEN法，探针法，等。根据模板的类型分为DNA类PCR试剂盒和RNA类PCR试剂盒 。
PCR试剂盒器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
PCR试剂盒技术特点：
1、准确可靠，临床双盲对照试验＞1000例，结果与金标准测序法比对，结果*性大于99%。
2、高灵敏：可检测低至10ng的人基因组DNA。
3、快速：整个检测流程只需3小时。
4、简便：试剂盒提供预混好的试剂，使体系配置操作简便。
5、防污染
6、高特异性：双重特异性组成，保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对，才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对，在延伸中产生荧光。
PCR试剂盒使用及效果:
在无内毒素试管中,加入100 uL细菌内毒素检查用水、内毒素标准溶液,或待测样品。再加入100 uL鲎试剂溶液,混匀,37ºC温育T1分钟。温育结束,加入100 uL显色基质溶液,混匀,37ºC温育T2分钟。温育结束,加入500 uL偶氮化试剂1溶液,混匀,加入500uL偶氮化试剂2溶液,混匀加入500 uL偶氮化试剂3溶液,混匀,静置5分钟,于545nm波长处读取吸光度值。
内毒素标准范围(EU/mL)为0.01-0.1,T1为60分钟,T2为6分钟；内毒素标准范围(EU/mL)为0.1-1,T1为10分钟,T2为6分钟。
