患者衍生类器官PDO+Matrigel分液解决方案
01、精准医学和个性化医疗的新宠：PDO
PDO(Patient-Derived Organoid), 即患者衍生的类组织器官，是有望提高新药研发效率和提高肿瘤治疗效果的新工具，不同于CDX (基于细胞系的异种移植肿瘤）和PDX（基于病人的异种移植肿瘤），是个性化治疗和精准医学的新宠儿。
目前PDO在技术应用上存在一些问题亟待解决，如培养技术仍不够成熟；有些癌症模型无法使用PDO进行建模；建模的效率不高等等。其中，各种肿瘤类器官细胞培养混合物由于成分复杂且粘稠，通常是手动操作，难以实现自动化，从而制约了其用于高通量和大规模应用。
Organoids登上了2019年《科学》杂质的封面
02、SPT Labtech& Corning 康宁共同开发基于PDO+Matrigel混合物分液的解决方案
dragonfly discovery是SPT Labtech 研发的多功能分液工作站，目前主要用于药物研发中的方法学开发(assay development)、高通量筛选(HTS) 以及酶和细胞学实验(enzyme based cell assay)。
DFD有以下独特的优势：
1. 超大的量程（200 nL- 4 mL）
2. 超低的死体积（＜50 uL）
3. 超高的精度（12.5 nL ）
4. 超快的速度（26秒完成384孔板分液）
5. 无视液体粘度（70%甘油，吐温，75%乙醇，各种Matrigel胶和基质胶）
dragonfly discovery® from SPT Labtech
Matrigel®是Corning公司分离自Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤的可溶性基底膜提取物，主要适用于3D细胞的培养。Matrigel对温度非常敏感，超过10℃就会开始成胶，变得粘稠，因此需要在溶解后快速处理。
最近，SPT Labtech和Corning公司合作，共同开发类器官和Matrige胶的混合分液，通过dragonfly discovery成功将低至3 uL的人源肠类器官和Corning Matrigel混合物分配至96孔板，用于后续的forskolin-induced swelling (FIS) assay。
配备冷冻模块，10 min内保持matrigel在8℃以下
即便是粘稠的Matrigel和组织混合物也能完成分液
每一个液滴都能准确加入孔板正中央
03、实验结果
Figure.1 Uniform domes dispensed in the center of each well. Representative image of uniform, single domes dispensed in each well of a 96-well microplate with one well digitally zoomed in. Images were taken with High-Content Screening Platform using a 2X objective.
Fig.1 96孔中，2倍镜下的organoid dome
Figure 2. Consistency of dispense within a plate. The number of organoids dispensed in each dome from three 96-well microplates was enumerated in order to calculate consistency across each plate. Each plate resulted in a CV of less than 18%
Fig.2 每个孔内organoid的数量是均一的
Figure 3. Representative images before and after forskolin addition. Representative photomicrographs demonstrating healthy and CF organoid swelling response under different conditions. Images were taken by High-Content Screening Platform using a 2X objective
Fig.3 Forskolin刺激后，在不同条件下的Organoid的反应04、结论
PDO虽然有广泛的应用前景，如体外药敏检测等，但由于其培养基是天然提取物，价格很高，培养所涉及的多种细胞因子价格也不菲，因此降低成本，提高自动化程度和通量是进一步发展类器官平台的重要方向之一。目前，SPT Labtech成功将Corning Matrigel和类器官混合物在微缩化体系（3 uL/96孔，200 nL/384孔）中添加，正是朝着低成本化迈出重要的一步，更多的应用正在开发中，敬请期待。
3uL in 96孔板, 200 nL in 384孔板完整视频：
PDO(Patient-Derived Organoid), 即患者衍生的类组织器官，是有望提高新药研发效率和提高肿瘤治疗效果的新工具，不同于CDX (基于细胞系的异种移植肿瘤）和PDX（基于病人的异种移植肿瘤），是个性化治疗和精准医学的新宠儿。
目前PDO在技术应用上存在一些问题亟待解决，如培养技术仍不够成熟；有些癌症模型无法使用PDO进行建模；建模的效率不高等等。其中，各种肿瘤类器官细胞培养混合物由于成分复杂且粘稠，通常是手动操作，难以实现自动化，从而制约了其用于高通量和大规模应用。
Organoids登上了2019年《科学》杂质的封面
02、SPT Labtech& Corning 康宁共同开发基于PDO+Matrigel混合物分液的解决方案
dragonfly discovery是SPT Labtech 研发的多功能分液工作站，目前主要用于药物研发中的方法学开发(assay development)、高通量筛选(HTS) 以及酶和细胞学实验(enzyme based cell assay)。
DFD有以下独特的优势：
1. 超大的量程（200 nL- 4 mL）
2. 超低的死体积（＜50 uL）
3. 超高的精度（12.5 nL ）
4. 超快的速度（26秒完成384孔板分液）
5. 无视液体粘度（70%甘油，吐温，75%乙醇，各种Matrigel胶和基质胶）
dragonfly discovery® from SPT Labtech
Matrigel®是Corning公司分离自Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤的可溶性基底膜提取物，主要适用于3D细胞的培养。Matrigel对温度非常敏感，超过10℃就会开始成胶，变得粘稠，因此需要在溶解后快速处理。
最近，SPT Labtech和Corning公司合作，共同开发类器官和Matrige胶的混合分液，通过dragonfly discovery成功将低至3 uL的人源肠类器官和Corning Matrigel混合物分配至96孔板，用于后续的forskolin-induced swelling (FIS) assay。
配备冷冻模块，10 min内保持matrigel在8℃以下
即便是粘稠的Matrigel和组织混合物也能完成分液
每一个液滴都能准确加入孔板正中央
03、实验结果
Figure.1 Uniform domes dispensed in the center of each well. Representative image of uniform, single domes dispensed in each well of a 96-well microplate with one well digitally zoomed in. Images were taken with High-Content Screening Platform using a 2X objective.
Fig.1 96孔中，2倍镜下的organoid dome
Figure 2. Consistency of dispense within a plate. The number of organoids dispensed in each dome from three 96-well microplates was enumerated in order to calculate consistency across each plate. Each plate resulted in a CV of less than 18%
Fig.2 每个孔内organoid的数量是均一的
Figure 3. Representative images before and after forskolin addition. Representative photomicrographs demonstrating healthy and CF organoid swelling response under different conditions. Images were taken by High-Content Screening Platform using a 2X objective
Fig.3 Forskolin刺激后，在不同条件下的Organoid的反应
PDO虽然有广泛的应用前景，如体外药敏检测等，但由于其培养基是天然提取物，价格很高，培养所涉及的多种细胞因子价格也不菲，因此降低成本，提高自动化程度和通量是进一步发展类器官平台的重要方向之一。目前，SPT Labtech成功将Corning Matrigel和类器官混合物在微缩化体系（3 uL/96孔，200 nL/384孔）中添加，正是朝着低成本化迈出重要的一步，更多的应用正在开发中，敬请期待。
3uL in 96孔板, 200 nL in 384孔板
