单细胞ICP-MS联合HCS为您揭秘顺铂化疗耐药机制

顺铂（Cisplatin）是1978年经FDA批准用于临床治疗癌症的化疗药物。顺铂药物的治疗机制是通过结合形成Pt-DNA复合物，干扰DNA复制合成，从而杀死快速增殖的癌细胞，属于细胞周期非特异性药物。许多癌症患者最初对基于铂类的治疗比较敏感，但一段时间后，患者通常对顺铂治疗表现出耐药性，导致了癌症复发。因此在化疗后细胞必须修复DNA 损伤，否则DNA 复制受阻会导致细胞死亡。对于顺铂的耐药机制研究，也是目前抗癌药物研究热点。目前三种主要的分子机制包括DNA 修复加速，胞浆失活加速和细胞摄取药物能力的变化。其中，细胞摄取药物能力的变化主要表现在细胞对顺铂的摄入能力降低及顺铂转运加速。

 

 

细胞内顺铂的摄入与肿瘤负荷相关，也就是说肿瘤对顺铂反应降低会导致细胞内顺铂的含量降低。所以，分析单个细胞水平对顺铂的摄入和分布对于评估治疗的有效性具有非常重要的意义。过多顺铂进入细胞内会增加DNA 损伤和细胞死亡的频率。了解单个细胞水平及细胞亚群对顺铂的摄入的机制将能为新疗法的开发提供科学依据，以改善肿瘤对顺铂的耐药性，降低肿瘤复发率。

 

单细胞电感耦合等离子体质谱 (SC-ICP-MS)是以单颗粒电感耦合等离子体质谱技术为基础，测量单个细胞（或单个纳米颗粒）在进入等离子体时产生的离散信号，对溶液中对金属元素进行评估与定量。每个细胞中的金属成分离子化，产生离子流，检测器以每秒100000 数据点的速度快速对信号采集测量，从而使得单个细胞中的金属含量能被定量到阿克（ag）/ 每细胞的水平。相比测量细胞内顺铂摄入的传统方法，SC-ICP-MS 所得结果的信息量更加全面。

通过对两株卵巢癌细胞系A2780（顺铂敏感型）和A2780/CP70（顺铂耐药型）顺铂摄入量的实时检测发现：相比A2780 敏感细胞系，顺铂摄入在耐药性的A2780/CP70 细胞系上水平降低；但顺铂摄入的细胞差异性不是由于细胞周期的不同，因为血清饥饿细胞并不改变顺铂的整体摄入。顺铂摄入的胞内差异性是由于其他尚未确定的因素造成的。

 

 

“三阴性”乳腺癌（Triple-Negative Breast Cancers, TNBC）是指雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体（HER2）均阴性的一种特殊类型乳腺癌。“三阴性”乳腺癌约占所有乳腺癌的10-20%， 但因其缺乏内分泌及抗HER2治疗的靶点，目前治疗尚以传统外科切除、化疗及放疗为主。铂类药物化疗是目前针对晚期乳腺癌治疗的标准治疗方案。[2]顺铂类药物已被报道通过解偶联DNA复制周期和中心粒复制调控造成中心粒扩增，从而抑制肿瘤细胞增殖。