ELISA技术采用抗原与抗体的特异反应将待检物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量检测。检测的对象可以是抗体也可以是抗原。
ELISA检测方法中有三种必要的试剂:1.固相的抗原或抗体(免疫吸附剂);2. 酶标记的抗原或抗体(标记物);3. 酶作用的底物(显色剂)。
检测时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。
其所生成的颜色深浅与待测的抗原(抗体)含量相关,这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察,也可用分光光度计(酶标仪)加以测定。其方法简单、方便迅速、特异性强。
分类
· 双抗夹心法
· 间接法
· 竞争法
· 双位点一步法
· 捕获法测IgM抗体
· 应用亲和素和生物素的ELISA
技术特点
· 灵敏度高
ELISA的灵敏度来自作为报告基团的酶。酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象,因此ELISA体系也被称为酶放大体系。ELISA实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位,或在微克,甚至纳克水平上对其进行定量。
· 特异性强
ELISA检测的特异性来自抗体或抗原的选择性。抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。
SBC自主研发的ELISA检测试剂盒
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上海生物芯片有限公司成立于2001年8月,公司由上海科技创业投资(集团)有限公司、上海张江(集团)有限公司、中科院上海有关院所、上海交通大学等在上海的国内知名大学、研究所、医院和企业共同组建而成,经国家发展与改革委员会批准公司建设和运行“生物芯片上海国家工程研究中心”,是我国生物医药领域规模最大的生物技术国家工程研究中心之一,是全国生物样本标准化技术委员会(TC559)、中国医药生物技术协会组织生物样本库分会(BBCMBA)与中国抗癌协会肿瘤样本整合研究分会的秘书处与主任委员单位。
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