shRNA表达载体构建

shRNA表达载体构建 　　　shRNA（short hairpin RNA, shRNA）是一段小发卡或短发卡RNA序列，一般长19~23bp，常被用于RNA干扰沉默靶基因的表达。利用载体把shRNA导入细胞，载体中的U6或H1启动子确保shRNA的表达；shRNA的发卡结构可被细胞机制切割成siRNA，然后siRNA结合到RNA诱导沉默复合物上（RNA induce -d silencing complex，RISC），该复合物能够结合到目的mRNAs并将其降解。通过载体可以将shRNA整合到细胞基因组中，从而使细胞长期稳定表达shRNA。 　　　百恩维生物可提供多种shRNA表达载体，如慢病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、以及普通的真核表达载体等；同时也有多种荧光报告基因可供选择，如GFP、eGFP、tdTomato、YEP等；另外还有药筛基因可供选择：Puromycin、Neomycin等，用于后期构建稳定表达shRNA的细胞株。 　　　百恩维生物可以构建常规的1条shRNA干扰表达载体，也可在同一个表达载体中构建多条shRNA（百恩维生物的专利技术），干扰效果更强。 　　　您只需告诉我们您需要干扰的目的基因，我们就会为您设计相应高质量的shRNA序列信息，其干扰效率保证大于70%。 　　技术服务内容如下： 　　　1、接受客户目标基因信息； 　　　2、分析目标基因，并设计高质量的shRNA序列； 　　　3、PCR退火形成shRNA双链； 　　　4、将shRNA双链克隆至含有U6或H1启动子的表达载体上； 　　　5、测序以确保插入序列的正确性； 　　　6、向客户提交测序结果与实验方法报告单。 　 　　　 　　　

百恩维生物科技有限公司（BioWit Technologies），是一家专业从事生物科技前沿技术研发的高新技术企业。为国内外众多药厂和科研机构提供病毒包装，蛋白表达，载体构建，干细胞培养基，转染试剂、细胞因子等产品及技术服务。公司专家团队曾在国内外知名学府和国际一流制药公司从事研发多年。