microRNA表达载体构建
MicroRNA(miRNA)是一类真核生物内源性的小分子单链RNA,通常长为18~25nt,能够通过与靶mRNA特异性的碱基配对结合,引起靶序列降解或抑制其翻译,从而对基因进行转录后的表达调控。构建miRNA表达载体,实现microRNAs在细胞中稳定表达,能够弥补瞬时转染持续时间短的不足,miRNA的表达方式通常包括pri-miRNA,pre-miRNA与成熟microRNAs形式。
百恩维生物有多种表达载体,如真核表达载体、各种病毒表达载体等;可选择各种荧光报告基因,如GFP、eGFP、tdTomato、YEP等。
百恩维生物提供以下两种miRNA表达方式:(1)pri-miRNA(初级转入产物)的表达形式;(2)pre-miRNA(miRNA前体)的表达形式。
客户只需提供miRNA的具体信息及指定过表达载体类型(如慢病毒载体),我们完成序列合成,质粒构建。
技术流程如下:
1、miRNAs序列分析;
2、PCR引物设计及合成;
3、PCR扩增pri-miRNA序列或者单链互补引物退火形成pre-miRNA序列;
4、将片段克隆至含有CMV强启动子的载体上;
5、测序以确保插入序列正确性;
6、向客户提交测序结果与实验方法报告单。
服务项目 实验周期 收费标准
miRNA 前体(pre-miRNA)表达载体构建 1~2周 2000元
miRNA inhibitor 表达载体构建 1~2周 2500元
初始miRNA(pri-miRNA)表达载体构建 1~2周 3000元
bio-equip.com
百恩维生物科技有限公司(BioWit Technologies),是一家专业从事生物科技前沿技术研发的高新技术企业。为国内外众多药厂和科研机构提供病毒包装,蛋白表达,载体构建,干细胞培养基,转染试剂、细胞因子等产品及技术服务。公司专家团队曾在国内外知名学府和国际一流制药公司从事研发多年。
百恩维生物在深圳宝安高新奇工业园拥有世界一流的生物学实验室,包括多种先进的实验设备,以及一批经验丰富的技术人员。为客户提供最全面的病毒包装技术服务,除了常规病毒类型,还有非整合型慢病毒,9种血清型的腺相关病毒等极有特色的病毒包装服务。
百恩维为客户生产的干细胞培养基已经进入多项临床前试验阶段,产品质量控制指标达到临床使用样品要求。百恩维生物还提供数千种重组蛋白、以及转染试剂等产品。
百恩维生物建立起完善质量保证体系,所有产品均有卓越的质量保证。
百恩维生物已经拥有自主知识产权的产品2项,发明专利技术3项,并与国内外知名大学、中科院以及医科院等知名科研机构建立了良好的合作关系,在生物尖端技术方面能够持续创新。
百恩维生物将本着“专注、创新、诚信、和谐”的企业理念,为生物技术能够为人类健康造福而不懈追求!
●病毒包装技术服务:腺病毒、慢病毒、非整合型慢病毒、腺相关病毒、杆状病毒、逆转录病毒
● 载体构建:过表达载体、ShRNA表达载体、miRNA表达载体
● 蛋白表达与纯化:原核蛋白、真核蛋白、昆虫杆状病毒蛋白
● 干细胞培养基:干细胞无血清培养基、干细胞含血清培养基
●转染试剂:HET、Polyfectine、UES
●细胞因子:数千种细胞因子