蛋白质组学：蛋白表达与纯化实验技术服务

步骤1. 目标基因全基因合成：
1. 从基因库中搜索目标蛋白的cDNA序列。如果我们的cDNA文库中有这个基因，我们免费提供给客户。
2. 根据选用的表达系统对cDNA进行密码子优化，密码子优化。
3. 合成设计好的基因序列。

步骤2. 目标基因亚克隆：
1. 扩增并抽提含有目标基因的载体质粒。
2. 将目标基因亚克隆到合适的表达质粒上。
3. 测序验证构建质粒的准确性。
4. 提供如下表达载体：提供给客户：正确构建的重组表达质粒，含重组质粒的DH5α菌株及测序报告。

步骤3. E. coli表达菌株转化及筛选：
1. 扩增并抽提构建好的表达质粒。
2. 将表达质粒转化到高效的E.Coli表达菌株中。
3. 至少挑选5个阳性克隆于LB培养基中扩增并诱导表达目标蛋白。
4. SDS-PAGE电泳检测培养后中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。
5. 可提供表达菌株：DH5α, Top10, JM115, BL21 (DE3), BL21 (DE3) pLys, XL1 Blue, XL10 Golden, Rosetta-gami。
提供给客户：重组质粒的表达菌株及表达检测报告。

步骤4. 目标蛋白表达及纯化：
1. 摇瓶培养1L重组细菌，诱导表达目标蛋白。
2. 通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
3. 利用蛋白酶去除不需要的纯化标签，再纯化获得所需的目标蛋白（可选，构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点）。
4. 通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5. 通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

提供给客户：纯化好的目标蛋白1-5mg及纯化报告。
实验具体收费、标本的收集、实验试剂的定购等事宜，请联系嘉美生物。
实验预约热线：400-698-4168   010-58464308   010-58464306
实验预约邮箱：jiamei_bj@126.com   info@

中国生命科学实验技术服务、定制高端平台——嘉美生物实验技术中心

嘉美生物，是一家专注于生命科学领域的高科技企业。公司成立于2004年，自成立以来，公司秉承“关注生物技术，服务生命科学”的理念，致力于服务广大科研工作者，提供优质产品及服务。让生命科学研究，“专业化，简单化，快速化”是嘉美人不懈追求的目标。目前，公司独家经销美国ABGAB，GTS等公司的产品；全国总经销的品牌有：Abnova，ABR，Ebioscience，Neomarkers/Lbvision，Santa Cruz，Biovision，MP(美国分子探针公司)，Assay Design，Stressgen，Novus，Genetex等公司；经销代理：ABR，Alexis，Abgent，Amaxa，Bender，Chemicon，Linco，Cayman，Merck，Peprotech，KPL，SBA，Serotec，Upstate，Sigma，CST，R&D，Zymed，Biosource，Caltag，BioVendor，EPITOMICS，DSL，Finnzymes，Invivogen，Vector，GenWay，Roche，LifeSpan，Rockland，Mebtech，BD，Invitrogen，Bethyl，Jackson，Vector，Pierce，Biomol等公司产品。嘉美的产品和服务涵盖生命科学研究技术的诸多方面,提供覆盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等领域的实验室产品、生物技术服务以及专业生物统计分析等咨询服务。面对日益激烈的市场竞争，公司将通过建立一支拥有专业、可靠、高效的队伍，努力在产品的售前、售中和售后都提供专业的技术服务，确保我们的用户和合作伙伴无后顾之忧。嘉美生物正朝着多元化，集团化发展，将通过建立一支拥有专业、可靠、高效的队伍来确立嘉美生物在全球生物产业界的地位。希望我们的专业、真诚和努力能赢得您的信赖！希望我们能携手走得更稳、更快、更远！