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T5 Direct PCR kit (Plant) /PCR系列

英文名称：	T5 Direct PCR kit (Plant)	总访问：	2358
国产/进口：	国产	半年访问：	86
产地/品牌：	擎科生物	产品类别：	分子生物学试剂
规格：	TSE011	最后更新：	2024-3-28
货号：
CAS 号：
参考报价：	1299元/5×1.0 mL
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销售商：北京擎科生物科技有限公司

产品介绍
公司简介

T5 Direct PCR kit (Plant)

植物组织样品直接扩增，高保真度，极速延伸（10 s/kb）

【产品简介】
本产品是一款专为叶片、种子等植物样品直接扩增设计的试剂盒，适用于2 kb以内DNA片段的扩增。植物样品经过简单的裂解处理即可作为PCR扩增模板，无需进行基因组DNA的提取，使用更加简便。产品中所含的T5 Plant DNA Polymerase，是在具有校正活性的高保真DNA聚合酶基础上改造而来，特殊的DNA-Binding结构Sso7d蛋白结构域的融合使其具有超快的延伸速度，同时基于lacZα法测试，该酶的保真度为野生型Taq DNA聚合酶的20倍。产品中特别添加特异性增强因子SuperPrime及延伸增强因子Extension Ehancer，显著提高了扩增产量与特异性，优化的反应缓冲液可减少扩增条件探索，极大地节省时间。
本产品为2×浓度的PCR直扩预混液，已包含合适浓度的Mg²⁺、DNA聚合酶和dNTPs，使用时只需添加模板和引物，并补水至1×浓度即可进行反应。使用本试剂盒扩增的产物为平末端，纯化后可用于后续克隆（推荐T载体目录号:TSV-007B）、酶切、测序及文库构建等实验。

【产品特点】
无需提取基因组DNA，操作简便，省时省力；
改造的T5 Plant DNA Polymerase，具有极高的抑制物耐受度，保真度为野生型Taq DNA聚合酶的20倍；
快速扩增，延伸速度高达10 s/kb；
适用于多种植物的叶片、种子等样品。

【产品应用】
适用于植物样品的直接扩增，可用于植物基因敲除分析、转基因检测等鉴定型实验，同时适用于对保真性要求较高的基因克隆等实验。

【产品组成及保存】
-25~-15℃保存2年。

组分	规格
2×T5 Direct PCR kit（Plant）	5×1.0 mL
Lysis Buffer A	1×10 mL
Dilution Buffer B	1×10 mL
Positive Control Primer Mix（RbcL）（10 μM each）	100 μL

【操作流程】

	50 µL 体系
2×T5 Direct PCR kit（Plant）	25 µL
10 μM Primer F	2 µL
10 μM Primer R	2 µL
Template DNA	1~3 µL
ddH₂O	Up to 50 µL

		温度	时间	循环次数
1	预变性	98 ℃	3 min	1 cycle
2	变性	98 ℃	10 s	30~40 cycles
	退火	Tm+3 ℃	10 s
	延伸	72 ℃	10~30 s/kb
3	终延伸	72 ℃	3~5 min	1 cycle

【实例分享】
两份水稻样品a，b用4对引物进行鉴定，产物大小分别为536 bp、980 bp、1800 bp、2300 bp。分别取2 mm水稻叶片使用Lysis Buffer A裂解后取1µL裂解液进行扩增。

【问题讨论】
Q1：直扩怎么取样？
A1：T5 Direct PCR kit（Plant）适用于植物叶片及种子、微生物等的直接PCR扩增，样品无需提取基因组DNA。样品推荐取样量如下：植物叶片、根茎≤2 mm。
植物种子≤2 mm（半粒绿豆大小）外壳比较坚硬的种子可进行研磨破碎
菌落：使用牙签或枪头轻轻粘取单个菌落（菌落痕量肉眼可见即可）菌液：≤10 µL
菌丝：使用牙签或枪头轻轻刮取适量新鲜菌丝，避免挑取培养基等其他杂菌物质蘑菇等大型真菌≤2 mm

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