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抗体(Ab)保存和稀释的注意事项

浏览次数:420 发布日期:2025-6-26  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
抗体(antibody,Ab)是机体在体内存在的外来分子、微生物等抗原物质刺激下,由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulins,Ig),主要分布在血清中,也分布于组织液及外分泌液中。


抗体的保存和稀释需要特别注意以下几个方面:
一、保存注意事项:

1. 温度控制:

短期保存(12周内使用):推荐在4℃避光保存,避免反复冻融。
长期保存:对于大多数抗体,分装后保存在20℃或80℃。20℃通常足够,除非说明书特别建议80℃。

1. 特定类型抗体:
  • HRP标记抗体:加50%甘油后于20℃保存,HRP底物需4℃避光保存。5
  • 酶联抗体:4℃保存,避免冻融。
  • 流式抗体(荧光素标记):4℃避光保存,不加甘油。
  • IgG3同型对照:4℃保存,避免冻融。
2. 分装:
    将抗体分装成适合一次实验用量的小份,避免反复冻融。
    分装体积不宜过小,至少10ul以上,以减少蒸发和管壁吸附的影响。
    复融后的抗体一次用不完,应保存在4℃,避免再冻。

3. 避光和防污染:
    对于光敏感的抗体,如荧光素标记抗体,应使用棕色管或锡箔纸避光保存。
    可加入叠氮钠(0.02% w/v)作为防腐剂,但注意其毒性,避免用于活细胞或体内实验。

4. 运输条件:
    一般运输在4℃进行,避免干冰运输,因为干冰运输后需解冻,增加一次冻融过程。
    收到后应立即按说明书要求保存。

5. 使用专用稀释液:
    有些抗体可能推荐使用特定的稀释液,如不含BSA和有毒防腐剂的即用型抗体稀释液。

二、稀释注意事项:

1. 选择合适的稀释液:
    无动物来源蛋白,不含叠氮钠等有毒防腐剂,如李记的通用型抗体稀释液。

2. 计算工作浓度:
    根据实验需求准确计算所需抗体体积和稀释液体积。

3. 操作规范:
    稀释后立即充分混匀,静置在4℃冰箱保存。
    使用后的工作液可在4℃保存46个月,但需注意反应强度变化。

4. 重复使用:
    可回收稀释后的抗体工作液,但要监测反应强度,必要时补充原液。

5. 注意背景和特异性:
    含有免疫增强剂和稳定剂的稀释液可能提供更干净的背景。

遵循这些注意事项,可以有效延长抗体的活性和使用效率,确保实验结果的准确性和可靠性。
发布者:上海邦景实业有限公司
联系电话:021-52960952
E-mail:3004965510@qq.com

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