生物素化SIRPα抗体:解析树突状细胞发育与亚群功能的关键工具?
简述
树突状细胞是先天免疫和适应性免疫之间的接口。造血干细胞先分化成共同髓系祖细胞(CMP),再在 Nur77 这类转录因子作用下走两条路:一边是单核细胞,一边是共同树突状细胞祖细胞(CDP)。
cDC2 是外周组织里数量最多的 DC 亚群,表面高表达 CD172a(SIRPα),于是这个分子成了识别 cDC2 的现成标记。这篇讲发育路径、cDC2 的分化调控、SIRPα 的结构功能,以及生物素化抗体在分选和多色流式里怎么用。
一、树突状细胞发育的起源与谱系分化路径
树突状细胞是专职抗原呈递细胞,在启动和调节适应性免疫应答中处于核心地位。所有DC均起源于骨髓中的造血干细胞,HSC 先分化为共同髓系祖细胞,后者是DC发育的关键起点。
CMP具有多向分化潜能,其命运抉择在DC亚群多样性形成中起决定性作用。在转录因子Nur77等关键调控分子的参与下,CMP可沿两条主要路径分化:一方面向单核细胞方向分化,最终发育为单核细胞来源的树突状细胞;另一方面分化为共同树突状细胞祖细胞,后者是经典DC与浆细胞样DC的共同前体。
Nur77在这一早期谱系分离中扮演着重要的调控角色,参与CMP向CDP或单核细胞方向的命运抉择,确保造血干细胞向不同髓系细胞亚群的有序分化。这种早期谱系分离为后续DC亚群的功能特化奠定了基础。
图示:原文配图(来源:斯达特官网技术软文)
二、cDC2亚群的分子特征与发育调控
经典DC分为cDC1和cDC2两个主要亚群,其中cDC2是外周组织中最丰富的DC亚群。cDC2的分化由Irf4、Zeb2、RelB和Notch2等转录因子驱动。Irf4是cDC2谱系的核心调控因子,它与Zeb2、RelB等共同塑造了cDC2的功能特征,使其偏向于激活CD4⁺T细胞,参与体液免疫应答和炎症调节。
在表面标志物方面,小鼠cDC2高表达CD11b、CD172a(SIRPα)及TLR1/TLR6;人类cDC2则以CD11b、CD172a和CD1c(BDCA1)为典型标记。CD172a(信号调节蛋白α,又称BIT)是cDC2亚群鉴定最关键的表面标志物之一,其特异性表达使该分子成为区分cDC2与其他DC亚群及髓系细胞的重要指标。
三、SIRPα(CD172a/BIT)的分子结构与功能
SIRPα属于信号调节蛋白家族成员,是一种表达于髓系细胞表面的抑制性受体。其胞外结构域与CD47结合,通过胞内免疫受体酪氨酸抑制基序传导抑制信号。在cDC2中,SIRPα的表达水平远高于cDC1和pDC,使其成为cDC2亚群鉴定的核心表面标志物。
SIRPα 的活不止当个标记。在 cDC2 的稳态维持和功能执行中,SIRPα-CD47信号轴参与调节DC的吞噬活性和T细胞激活阈值。在肿瘤微环境中,肿瘤细胞高表达的CD47与DC上的SIRPα结合,可抑制DC的抗原呈递功能,促进免疫逃逸。
四、生物素化SIRPα抗体的核心应用
生物素化SIRPα抗体作为研究工具,在DC生物学研究的多个环节发挥关键作用:
在DC亚群鉴定与分选中,生物素化抗体可通过链霉亲和素偶联的磁珠或荧光染料,用于流式细胞术或磁珠分选中特异性标记cDC2亚群,区分cDC2与cDC1、pDC及单核细胞。
在分化发育研究中,可用于追踪CMP向CDP和cDC2分化的过程中SIRPα表达的动态变化,评估Nur77等转录因子对cDC2谱系建立的调控效应。
在功能研究中,可用于阻断SIRPα-CD47相互作用,探讨该信号轴在cDC2介导的T细胞活化、炎症调节及肿瘤免疫逃逸中的功能。
在多色流式分析中,生物素化标签可与多种荧光染料组合使用,为复杂免疫细胞群体的精细免疫分型提供更多颜色选择。
斯达特提供的CD172a(SIRPα)抗体:三种种属与标记组合
表里三支都靶向 CD172a(SIRPα),差别在种属和标记,选之前先看清自己要染的是人样本还是小鼠样本。
货号
S0B8543 是 Biotin 标记的小鼠抗人(克隆 15-414),25T / 100T;
S0B5184 是 FITC 标记的大鼠抗小鼠(S-R713),25T 到 500T;
S0B8553 是 FITC 标记的小鼠抗人(15-414),25T / 100T。具体规格与价格以官网产品页为准:
| 货号 |
产品名称 |
商品参数 |
参考货期 |
规格 |
价格 |
| S0B8543 |
Biotin Mouse Anti-Human CD172a (SIRPα) Antibody (15-414) |
来源 : Mouse;
标记 : Biotin |
现货 |
25T / 100T |
¥250 |
| S0B5184 |
FITC Rat Anti-Mouse CD172a (SIRPα) Antibody (S-R713) |
来源 : Rat;
标记 : FITC |
现货 |
25T / 50T / 100T / 500T |
¥500 |
| S0B8553 |
FITC Mouse Anti-Human CD172a (SIRPα) Antibody (15-414) |
来源 : Mouse;
标记 : FITC |
现货 |
25T / 100T |
¥925 |
结语:标记方式决定实验设计
cDC2 的鉴定,说到底是在一群髓系细胞里把 CD172a 高表达的那一小撮挑出来。生物素化抗体的价值在灵活:同一个抗体,配不同链霉亲和素试剂,就能在流式和磁珠分选之间切换。
你现在的 panel 里,CD172a 这一通道还留着空位吗?
本文由斯达特技术专家团审核发布
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