TR-FRET试剂盒助力PROTAC降解剂活性与DC50测定
PROTAC、分子胶作为靶向蛋白降解的前沿技术，为众多传统不可成药靶点带来全新药物开发机会。在降解剂研发过程中，细胞水平靶蛋白降解能力评价、DC50测定是化合物活性筛选的核心环节。
传统依靠 Western Blot 评估蛋白降解，操作繁琐、通量极低、人为误差大，很难满足化合物的高通量初筛需求。依托THUNDER® TR‑FRET 技术诞生的细胞内信号通路总蛋白检测试剂盒，专为细胞内靶蛋白定量、降解剂活性评价打造，完美适配PROTAC、分子胶药物筛选工作。
🧪检测原理｜均相夹心法 TR‑FRET，精准定量细胞内靶蛋白
采用TR‑FRET夹心免疫检测：使用一对分别标记Eu供体荧光基团、FR受体荧光基团可识别靶蛋白不同表位的特异性抗体。
1,细胞给药处理后，使用试剂盒中的裂解液裂解细胞；
2,加入预混双标抗体，若样本中存在完整靶蛋白，两个抗体同时结合靶蛋白，供体与受体空间靠近，激发后产生 TR‑FRET 信号；
3,靶蛋白被 PROTAC/分子胶降解后，完整靶蛋白含量下降，665nm信号同步降低；通过计算665 nm/615 nm信号比值，即可相对定量细胞内靶蛋白丰度，直接拟合得到降解效力DC₅₀数值。
💡核心特点：免洗均相检测，“加样‑孵育‑读板” 简单流程；兼容贴壁、悬浮细胞；适配96/384孔板，可对接自动化工作站，真正实现
高通量筛选；试剂盒包含裂解液、抑制剂cocktail、阳性对照裂解物，开箱即可开展实验。具备优秀筛选窗口，数据稳定可靠。
📦重点试剂盒｜多款降解热门靶点，经过充分实验验证
✅THUNDER™ Total IRAK4 TR‑FRET试剂盒
货号：KIT‑IRAK4‑100/500/2500/5000/10000用于检测细胞内总IRAK4蛋白；已在THP‑1悬浮细胞、MCF‑7贴壁细胞完成方法学验证。
PROTAC分子KT‑474 处理后，可检测到浓度依赖性IRAK4
降解，GAPDH内参蛋白信号保持稳定；不同孵育时长均可得到可靠DC₅₀结果，支持时间梯度降解动力学研究。
✅THUNDER™ Total CDK2 TR‑FRET试剂盒
货号：KIT‑CDK2‑100/500/2500/5000/10000 定量细胞内总CDK2蛋白；在Jurkat、NIH‑3T3细胞完成验证。 PROTAC分子CPS2处理后
CDK2呈剂量依赖性下降；阴性对照分子BSJ‑04‑132（CDK4 降解剂）不会影响CDK2蛋白水平，交叉实验证实试剂盒中的抗体不会和
CDK1/4/5/6/8/9发生交叉反应，特异性强。
✅THUNDER™ Total GSPT1 TR‑FRET试剂盒
货号：KIT‑GSPT1‑100/500/2500/5000/10000针对分子胶明星靶点GSPT1；在 A549、HELA细胞体系完成完整验证。可同时对比多款
分子胶化合物（CC‑885、MRT‑2359、CC‑90009、SJ6986）降解活性，VAV1降解剂作为阴性对照无作用；Z'高达0.92，筛选性能出众；可同
步检测GAPDH作为内参，排除细胞毒性带来的假阳性干扰。
✅THUNDER™ Total VAV1 TR‑FRET 试剂盒
货号：KIT‑VAV1‑100/500/2500/5000/10000检测细胞总VAV1蛋白；Jurkat悬浮细胞验证。使用IRAK4降解剂作为阴性对照，不会下调
VAV1蛋白；Z'=0.94，信噪比优异；1h短孵育即可获得有效信号，支持降解时间动力学考察；lysate梯度稀释信号线性良好，定量范围宽。
全系列规格覆盖100T‑10000T，兼顾科研小试与药企大批量筛选；试剂盒含裂解缓冲液、磷酸酶抑制剂混合物、标记抗体混合物、阳性对照裂解物等全套组分；‑80℃保存，仅供科研使用，不用于临床诊断。
✨产品核心优势
✅ 替代传统WB，通量大幅提升 摆脱制胶、转膜、孵育抗体繁琐手工步骤，兼容384孔板高通量筛选，大幅降低人力成本，适合大量化合
物DC₅₀批量测定。
✅ 特异性强，有效避免假阳性 经过靶点交叉反应验证；实验可同步检测管家蛋白，区分 “靶点特异性降解” 和 “细胞毒性引起的蛋白
非特异性下降”。
✅ 贴壁 & 悬浮细胞通吃 肿瘤悬浮细胞THP‑1、Jurkat；贴壁细胞MCF‑7、A549、HeLa、NIH‑3T3均经过验证，适配多种PROTAC研究
常用细胞模型。
✅ 方法学成熟，可做动力学研究 支持不同孵育时长梯度，短至1h即可获得有效信号；可开展时间‑降解动力学实验，研究化合物降解起
效快慢。
✅ 兼容主流酶标仪 适配配备TR‑FRET模块的酶标仪。
🎯适配研究场景
🔹 PROTAC、分子胶等小分子化合物细胞水平降解活性初筛
🔹 降解分子DC₅₀剂量‑效应曲线测定、活性复证
🔹 化合物降解时间动力学、细胞模型交叉验证
🔹 高通量化合物筛选
🔹 新降解分子的特异性、脱靶风险初步评估
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TR-FRET KinActive试剂盒及耗材 |
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产品名称 |
货号 |
规格 |
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THUNDER™ Total VAV1 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit |
500T |
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THUNDER™ Total IRAK4 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit |
500T |
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THUNDER™ Total GSPT1 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit |
500T |
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THUNDER™ Total CDK2 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit |
500T |
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THUNDER™ Total 4EBP1 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit |
500T |
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THUNDER™ Total STAT6 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit |
500T |
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THUNDER™ Total CREB TR-FRET Cell Signaling Assay Kit |
500T |
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THUNDER™ Total EGFR TR-FRET Cell Signaling Assay Kit |
500T |
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THUNDER™ Total SMAD3 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit |
500T |
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THUNDER™ Total p70S6K TR-FRET Cell Signaling Assay Kit |
500T |
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微孔板（384孔板，白色，浅孔） |
1箱 |
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🛠试剂盒定制服务｜按需开发，解决个性化实验难题
如果现有标准化试剂盒无法匹配您的独特靶点、特殊实验体系，我们可提供一站式试剂盒定制开发服务。
需要获取产品说明书、技术支持、样品试用，或是咨询试剂盒定制开发，欢迎联系：
