髓系白血病研究常用株 MV-4-11悬浮培养与传代方法简介
关键词：MV-4-11；悬浮培养；FLT3-ITD
做急性髓系白血病（AML）尤其是 FLT3-ITD 突变方向的同学，MV-4-11 是绕不开的一株。它是携带 FLT3 内部串联重复突变的重要模型，FLT3 抑制剂筛选几乎都用它。
MV-4-11 是人髓性单核细胞白血病细胞，由 Rovera 课题组从一名 10 岁双表型髓性单核细胞白血病男孩的外周血建立。IL-3 可独立支持其长期生长；10% FBS 培养时无需额外加 IL-3。可用于 3D 培养、免疫紊乱与免疫学研究，也是合适的转染宿主。
细胞背景与来源
来源：人，外周血（双表型髓性单核细胞白血病）。悬浮生长，圆形，偶有小聚团（正常，无需吹散），少量贴壁细胞可丢弃。
应用场景与研究价值
- 白血病研究：AML 发生机制、FLT3-ITD 突变与靶向治疗研究。
- 药物筛选：FLT3 抑制剂等抗白血病药物的活性评价。
- 免疫学：细胞因子（IL-3、GM-CSF、G-CSF）对增殖的调控研究。
培养特性与注意事项
- 培养基：IMDM + 10% FBS + 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。对血清要求高，建议用进口优质血清；有密度依赖性，密度低时增殖慢，推荐维持在 50-100 万细胞/mL。
- 传代/换液：对离心敏感，常规扩增别频繁离心。密度到 100 万细胞/mL 按 1:2 传代，可混匀后直接分瓶补足培养基；换液用半换液法。离心 900-1000 rpm、3 min。
- 冻存：92% FBS + 8% DMSO（或 92% 完全培养基 + 8% DMSO），密度 200-300 万细胞/mL/管，程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏：37℃ 水浴 2 min 内，900-1000 rpm 离心 2 min。生物安全：BSL-1，人源细胞建议按 BSL-2 防护操作。
- 注意：偶有小聚团正常，别吹散；碎片多时密度高时低速离心（900 rpm、3 min）去除，密度低时别离心；悬浮细胞偏脆弱，吹打轻、离心转速别太高。
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