InnoScan 生物芯片扫描仪赋能糖组学助力解析双功能 POGase 蛋白特性

黏蛋白型 O-糖基化广泛存在于哺乳动物蛋白修饰过程中，主要参与细胞互作、免疫调控及肿瘤病变；宿主上皮细胞表面 O-聚糖是细菌识别、黏附和入侵的关键配体。目前，N-糖已有成熟的商用释放酶（PNGase F），O-糖长期缺少通用酶工具，极大限制了O-糖组学发展。本研究对放线菌来源的新型 GH101 蛋白（POGase内切半乳糖胺酶）进行分析，寻找可降解唾液酸化O-糖的天然酶，并探究其具有黏附素活性的分子机制。

2025年，美国食品药品监督管理局研究团队对POGase（Peptide:O-Glycosidase，肽:O-糖苷酶）进行多糖微阵列分析，比较其全长蛋白、N端结构域和C端结构域对不同糖链的结合情况。

作者单位：美国食品药品监督管理局药品评价与研究中心
期刊：Nature Communications
发表年份：2025年
研究对象：放线菌来源的POGase蛋白
芯片类型：多糖微阵列
扫描分析仪：InnoScan 1100 AL微阵列生物芯片扫描分析仪
研究者将带有His标签的POGase TB-FL、TB-ND和TB-CD蛋白分别稀释至100 μg/mL，并加入至Legacy CFGv6多糖微阵列表面，4 ℃避光条件下孵育2 h。孵育后对多糖芯片进行清洗，随后加入5 μg/mL的 Alexa Fluor 647标记的抗His标签抗体，4 ℃孵育1 h。芯片清洗后经离心干燥，最后使用InnoScan 1100 AL微阵列生物芯片扫描分析仪对多糖芯片进行扫描和荧光信号分析，扫描分辨率为5 μm/pixel（图1a）。

InnoScan扫描结果显示，POGase TB-FL和TB-CD在多个糖链结合位点荧光信号强度较高，而TB-ND整体荧光信号较低，提示POGase TB的糖链结合能力主要与C端结构域有关。多数糖链在末端加入唾液酸后，FL和CD的荧光信号降低或消失，表明POGase TB的结合既与糖链骨架有关，也受末端修饰状态影响。
本研究利用多糖微阵列芯片和InnoScan 1100 AL微阵列生物芯片扫描分析仪，系统地对放线菌来源的双功能 POGase进行分析，解决了 O-糖组学缺少广谱水解酶的行业痛点，为生物药糖基质控、基础糖生物学研究提供关键工具；GH101 蛋白作为首次报道的兼具聚糖水解与宿主黏附活性的天然酶，为感染性肠道疾病的理论研究与新药开发开辟了新思路。  
Innopsys 成立于1999年，总部位于法国图卢兹，专注于激光共聚焦微阵列生物芯片扫描分析仪的荧光检测硬件和软件的自主开发与生产，全球装机客户超过600家。
 
高灵敏度：激光实时共聚焦光路，独立线性PMT检测器
高分辨率：最高可达 0.5 μm/pixel
高信噪比：线扫描方式，图片无拼痕、无需阴影矫正，有效减少光漂白、降低信号损失
快速扫描：多个激光光路同时扫描，多个PMT同步检测
 
广泛应用于：
基因组学：寡核苷酸、核酸芯片用于基因功能分析、基因表型分析、基因突变检测等
蛋白质组学：蛋白、抗原抗体芯片对蛋白表达水平检测、功能蛋白筛选、蛋白质相互作用等
糖组学：糖芯片、糖蛋白芯片进行糖功能学、糖蛋白、植物凝集素等研究
化合物：小分子化合物芯片进行配体筛选、药物研发、疾病靶点筛选
细胞组织芯片：细胞代谢机制、信号传导；组织间蛋白表达差异等
scWest单细胞蛋白免疫印迹芯片
 
环亚生物科技（APG BIO）作为法国Innopsys公司中国区代理，为客户提供生物芯片扫描、点样以及高通量筛选的整体解决方案和服务。