实体肿瘤组织中性粒细胞分选纯度提升方案
中性粒细胞分选｜从 14.8% 到 79.9% 的纯度提升实测｜LY6G 阳选磁珠方案
中性粒细胞是人体外周血中数量占比最高的髓系免疫细胞，也是肿瘤微环境的核心组成部分。在实体肿瘤的发生、发展与转移全程中，肿瘤相关中性粒细胞（TANs）呈现出高度的功能异质性，高效从实体肿瘤组织中分离获得高纯度、高活性的中性粒细胞，是解析其功能机制、开发靶向干预策略的重要技术前提。
图1：中性粒细胞的热点研究领域
一、中性粒细胞的关键指标1、在骨髓、外周血中发育的关键指标
图2：中性粒细胞在骨髓与外周血中发育的关键指标
2、中性粒细胞的免疫调节：分化发育分型法 N1 / Nm / Na / Nisg
图3：基于分化发育阶段的中性粒细胞分型体系
基于分化发育阶段的分型体系进一步细化了中性粒细胞的异质性，将其划分为未成熟中性粒细胞、成熟中性粒细胞（Nm）、衰老中性粒细胞（Na）、干扰素刺激基因特征中性粒细胞（Nisg）等功能亚群。二、肿瘤相关中性粒细胞的双向调控功能
图4：肿瘤微环境中中性粒细胞的促肿瘤作用
图5：肿瘤微环境中中性粒细胞的抗肿瘤作用
肿瘤微环境中的中性粒细胞具有高度功能异质性，受肿瘤进展阶段与微环境信号调控，可发挥促肿瘤或抗肿瘤的双重作用。促肿瘤作用
• 诱导氧化性 DNA 损伤，驱动正常细胞恶变，启动肿瘤发生
• 促进肿瘤细胞增殖，加快肿瘤生长进程
• 诱导上皮 - 间质转化（EMT），提升肿瘤细胞侵袭迁移能力
• 促进肿瘤新生血管生成，为肿瘤生长提供营养与氧气供给
• 构建免疫抑制微环境，削弱机体抗肿瘤免疫应答
• 形成中性粒细胞胞外陷阱（NETs），助推肿瘤细胞增殖与远处转移
• 与肠道微生物群交互作用，间接调控肿瘤进展
抗肿瘤作用
• 在子宫癌中促使癌细胞脱离基底膜，抑制肿瘤原位侵袭
• 激活 IFN-γ 介导的抗肿瘤免疫通路，强化免疫杀伤效应
三、实操案例：实体肿瘤组织中的中性粒细胞获得
实验思路框架
分选效果验证
通过流式细胞术对分选前后的样本进行纯度、活率与回收率检测，结果如下：
图6：分选前——肿瘤单细胞悬液中中性粒细胞占比仅为 14.8%
图7：分选后阳性成分——中性粒细胞纯度提升至 79.9%
图8：分选后阴性成分——非目标细胞占比仅 0.85%
分选前肿瘤单细胞悬液中中性粒细胞占比仅 14.8%；分选后中性粒细胞纯度提升至 79.9%，非目标阴性细胞占比仅 0.85%。
